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熒光原位雜交技術
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  • 熒光原位(wei)雜交技術(Fluorescence

    In Situ Hybridization,FISH)利用(yong)核酸(suan)(suan)分子單(dan)鏈(lian)之間互補的(de)(de)堿基序(xu)列,通過(guo)(guo)標(biao)記的(de)(de)核酸(suan)(suan)探(tan)針與(yu)目(mu)標(biao)DNA或(huo)(huo)RNA進(jin)(jin)行(xing)雜交,進(jin)(jin)而定(ding)位和檢(jian)測(ce)特定(ding)DNA序(xu)列的(de)(de)技術(shu)。探(tan)針標(biao)記可以采用(yong)熒(ying)光、地高辛或(huo)(huo)者生物素。FISH技術(shu)的(de)(de)基本原(yuan)(yuan)理是(shi)使用(yong)已知的(de)(de)標(biao)記單(dan)鏈(lian)核酸(suan)(suan)作(zuo)為探(tan)針,按照堿基互補的(de)(de)原(yuan)(yuan)則(ze),與(yu)待檢(jian)材料中(zhong)未知的(de)(de)單(dan)鏈(lian)核酸(suan)(suan)進(jin)(jin)行(xing)雜交,形成可被檢(jian)測(ce)的(de)(de)雜交雙鏈(lian)核酸(suan)(suan)。由于DNA分子在染(ran)(ran)(ran)色(se)體(ti)(ti)上(shang)是(shi)沿(yan)著染(ran)(ran)(ran)色(se)體(ti)(ti)縱軸(zhou)呈線性排列,因此可以通過(guo)(guo)探(tan)針直(zhi)接與(yu)染(ran)(ran)(ran)色(se)體(ti)(ti)進(jin)(jin)行(xing)雜交,從而將特定(ding)的(de)(de)基因在染(ran)(ran)(ran)色(se)體(ti)(ti)上(shang)定(ding)位。與(yu)傳(chuan)統的(de)(de)放射性標(biao)記原(yuan)(yuan)位雜交相(xiang)比,FISH技術(shu)具有(you)快速(su)、檢(jian)測(ce)信號(hao)強、雜交特異性高和可以多(duo)重染(ran)(ran)(ran)色(se)等特點(dian)。該方法適用(yong)于植(zhi)物染(ran)(ran)(ran)色(se)體(ti)(ti)檢(jian)測(ce)、土壤(rang)(泥(ni)巴)中(zhong)細菌(jun)檢(jian)測(ce)。

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