液質聯用檢(jian)測(ce)中的“基質匹配(pei)校(xiao)準”是什么?
在(zai)液質聯用(yong)(LC-MS/MS)這(zhe)種(zhong)(zhong)高靈敏度的檢測(ce)技術(shu)中(zhong),樣品中(zhong)除了目標(biao)分(fen)(fen)析物以外(wai)的其他所有(you)(you)成分(fen)(fen)統稱為基(ji)質。這(zhe)些(xie)基(ji)質成分(fen)(fen)(如蛋白質、脂肪、鹽類(lei)、色素(su)、其他有(you)(you)機小(xiao)分(fen)(fen)子等)在(zai)離(li)子源電離(li)過(guo)程中(zhong),可能(neng)會與目標(biao)分(fen)(fen)析物競爭(zheng)電荷或(huo)改(gai)變離(li)子化效率(lv),導致目標(biao)分(fen)(fen)析物的信號被(bei)抑制或(huo)增(zeng)強(qiang)。這(zhe)種(zhong)(zhong)現象被(bei)稱為基(ji)質效應。
基質效應會嚴(yan)重影響定量結果的(de)準確(que)性:
*如果標準(zhun)品(pin)(pin)(pin)是(shi)用純溶劑配制的,而實際樣品(pin)(pin)(pin)含有復雜基質,那(nei)么標準(zhun)品(pin)(pin)(pin)在儀器上的響應(信號強度)可能與(yu)實際樣品(pin)(pin)(pin)中的目標物響應不(bu)同。
*這會導致基(ji)于純溶劑標準曲(qu)線計(ji)算出(chu)(chu)的樣品濃度出(chu)(chu)現顯著偏差(偏高或偏低)。
“基(ji)質匹配校準(zhun)”就是為了解決基(ji)質效(xiao)應帶來的干(gan)擾而(er)發(fa)展(zhan)的一(yi)種關鍵校準(zhun)策略。其核心思想是:
1.尋(xun)找“空白基質(zhi)”:找到或制備一種與待測樣品基質(zhi)類型相(xiang)同或極其相(xiang)似,但(dan)不(bu)含有目標分析物(wu)(或含量可忽略不(bu)計(ji))的樣品。
2.用空白基(ji)質配(pei)制標(biao)(biao)(biao)準(zhun)曲線(xian):將已知濃度的目標(biao)(biao)(biao)分析物標(biao)(biao)(biao)準(zhun)品加入到這份空白基(ji)質中,配(pei)制成一系列濃度的校準(zhun)標(biao)(biao)(biao)準(zhun)溶(rong)液。
3.建(jian)立校準(zhun)曲線:用這些在真實基質環境下(xia)的校準(zhun)標(biao)準(zhun)溶液上機分析(xi),建(jian)立信號響(xiang)應(如峰面積)與分析(xi)物(wu)濃度之(zhi)間的校準(zhun)曲線。
4.樣品測定:待測樣品也經過同(tong)樣的(de)前處(chu)理和儀器(qi)分析(xi)條件,其目標物的(de)信號(hao)響應代入到這條基于基質匹配建立的(de)校準曲線中進行濃度計(ji)算(suan)。
為什(shen)么基質匹(pi)配校準能減(jian)少(shao)干擾?
*模(mo)擬真(zhen)實環(huan)境:標準品和(he)樣(yang)品在離子源中經歷幾乎(hu)相同的基質(zhi)環(huan)境,基質(zhi)效(xiao)應對兩者(zhe)的影響程度相似。
*抵消效應:基質效應在(zai)標準品(pin)和樣品(pin)中被“平等化”,其干擾在(zai)計算(suan)濃度時很大(da)程度上被抵消了。
*提高準(zhun)確性(xing):顯著降(jiang)低(di)了因基質效應導致的定(ding)量偏差,使結(jie)果更接近真實值,尤其在復雜基質(如生物體液、食品、環境樣品)檢(jian)測中至關重要。
廣州中森檢測(ce)減少干(gan)擾的方法(包含(han)基質匹配校(xiao)準的應用)
廣州(zhou)中森檢測(ce)作為專(zhuan)業(ye)的第三方檢測(ce)機構,在利用LC-MS/MS進(jin)行高靈(ling)敏度、高特(te)異性(xing)檢測(ce)時(shi),會綜合運用多種策略(lve)來減(jian)少干擾,確保結果準確可靠,其中基質匹(pi)配校準是核心手(shou)段之一:
1.基(ji)質匹(pi)配校準的核(he)心應用(yong):
*嚴格(ge)篩(shai)選空白(bai)基(ji)質:針對(dui)不同樣品(pin)類型(如(ru)血清、尿液、組織、食品(pin)提取液、土壤/水提取物),精心尋找或(huo)制備合適的空白(bai)基(ji)質(如(ru)購(gou)買(mai)空白(bai)基(ji)質、使用陰性樣品(pin)、人工模擬基(ji)質等)。
*精確配制(zhi)標(biao)準曲(qu)線(xian):在空白基質中準確加入(ru)目標(biao)物(wu)標(biao)準品,建(jian)立覆蓋(gai)預期濃度范圍的(de)校(xiao)準曲(qu)線(xian),并嚴(yan)格監控其線(xian)性、精密度和(he)準確度。
*質控(kong)樣品(pin)驗(yan)證:使(shi)用在空(kong)白(bai)基質中加入已知(zhi)濃(nong)度目(mu)標物配(pei)制的(de)(de)質控(kong)樣品(pin)(QC),貫穿整個分(fen)析(xi)批(pi)次,持(chi)續監控(kong)方(fang)法(fa)的(de)(de)準(zhun)(zhun)確度和精密度,確保基質匹配(pei)校準(zhun)(zhun)的(de)(de)有效性(xing)。
2.優化樣(yang)品前處理:
*采(cai)用固(gu)相萃(cui)(cui)取(SPE)、液液萃(cui)(cui)取(LLE)、QuEChERS等高效的(de)凈化技術,盡可能(neng)去除干擾物,降低基質復雜(za)性(xing)。
*優(you)化提取溶劑、凈化條件,在保證目(mu)標物回收(shou)率的同(tong)時(shi)最大化去除(chu)基質干(gan)擾(rao)。
3.儀器條件優化:
*精細調整離子源參數(shu)(如溫度、氣(qi)流)、碰撞能量等,找到目標物最佳(jia)響(xiang)(xiang)應(ying)且受基質影響(xiang)(xiang)最小的條(tiao)件(jian)。
*利用LC的高效色譜(pu)分離能(neng)力,使目標物與(yu)潛在的干擾物在色譜(pu)柱(zhu)上實現(xian)良(liang)好(hao)分離,避免共流出干擾。
4.使用(yong)穩定同位素內標:
*在樣品和標準品中(zhong)加入(ru)化(hua)學性(xing)質(zhi)極其(qi)相似(si)但(dan)質(zhi)量(liang)數不同的穩定(ding)同位素標記的目(mu)標物作為(wei)內(nei)標。
*內標與目標物(wu)經歷幾乎相同的(de)基質效(xiao)應(ying)、前處理(li)損失(shi)和(he)儀器波動(dong),通過計算目標物(wu)與內標的(de)響應(ying)比(bi)值進(jin)行定(ding)量,能有效(xiao)校正基質效(xiao)應(ying)和(he)過程損失(shi)帶來的(de)變(bian)異(yi)。
總結(jie)來說,基質(zhi)匹配校(xiao)準是LC-MS/MS檢測中克服基質(zhi)效(xiao)應、保證定(ding)量準確(que)性的(de)(de)基石。廣(guang)州中森檢測通過嚴(yan)格(ge)實(shi)施基質(zhi)匹配校(xiao)準策略,并結(jie)合(he)高效(xiao)的(de)(de)前處理凈化、精(jing)密的(de)(de)儀(yi)器(qi)優(you)化以及穩定(ding)同(tong)位素內標法等手段,形成了一(yi)套(tao)完整的(de)(de)減少(shao)干(gan)擾、確(que)保檢測結(jie)果(guo)準確(que)可靠的(de)(de)技術(shu)體系,為各類復雜樣品的(de)(de)精(jing)準分析提供(gong)了堅實(shi)保障。
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