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通過分(fen)子檢測協助病理診斷
某些腫1瘤具有特定的分子病理學改變,對于病理常規染色難于診斷的這些腫1瘤,進行分子病理檢測可協助得出準確的病理診斷。例如淋巴1瘤的鑒別診斷往往依賴于形態和免1疫組化的綜合判斷,但有些時候,這些手段也不能滿足診斷的需要,這時我們通過IG或TCR基因重排檢測,可協助鑒別淋巴細胞的普通增殖和腫1瘤性增殖。
將少數菌(jun)落轉移(yi)到纖維(wei)素濾膜(mo)上(shang)
(1) 在含(han)有選擇性的瓊(qiong)脂平板上放一張纖(xian)維(wei)素濾膜(mo)。
(2) 用無(wu)菌(jun)牙(ya)簽將各個(ge)菌(jun)落(luo)先轉(zhuan)移至(zhi)濾(lv)膜(mo)(mo)上(shang)(shang),再轉(zhuan)移至(zhi)含有(you)選擇性但未放濾(lv)膜(mo)(mo)的瓊脂主(zhu)平板上(shang)(shang)。應按一(yi)定的格子進行劃線接種(或打點)。每菌(jun)落(luo)應分別劃線于兩個(ge)平板的相同位(wei)置上(shang)(shang)。后,在濾(lv)膜(mo)(mo)和主(zhu)平板上(shang)(shang)同時劃一(yi)個(ge)含有(you)非重組(zu)質粒的菌(jun)落(luo)。
(3) 倒置平板,于(yu)37℃培養至劃線的細菌菌落生長到0.5-1.0mm的寬度(du)。
(4) 用已裝防水黑色繪圖墨水的(de)針(zhen)頭穿透(tou)濾膜直至瓊脂,植物組(zu)織(zhi)RNA原位(wei)雜交(jiao)檢(jian)測服務,在3個以上的(de)不(bu)對(dui)稱位(wei)置作標記。在主平板大致相同(tong)的(de)位(wei)置上也作上標記。
(5) 用Parafilm膜(mo)封(feng)好主(zhu)平板,倒置貯放于4℃,直至獲(huo)得雜交(jiao)反應的結果。
(6) 裂解細菌,按本段下面所述方法,使釋放的DNA結合于纖維素濾膜。
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