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石蠟包埋切片實(shi)驗基(ji)本步(bu)驟主要有(you)以下(xia)幾步(bu):
1、取材:新鮮(xian)組(zu)織固定于(yu)4%多聚甲醛24h以(yi)上。將(jiang)組(zu)織從(cong)固定液取出在通(tong)風櫥內(nei)用手(shou)術刀將(jiang)目的部位(wei)組(zu)織修平整,將(jiang)修切好的組(zu)織和對應的標簽(qian)放(fang)于(yu)脫(tuo)水盒內(nei)。
2、脫水(shui):將脫水(shui)盒(he)放進(jin)吊籃里于脫水(shui)機(ji)內依次梯度酒(jiu)精進(jin)行脫水(shui)。75%酒(jiu)精4h-85%酒(jiu)精2h-90%酒(jiu)精2h-95%酒(jiu)精1h-無(wu)水(shui)乙(yi)醇(chun)I 30min-無(wu)水(shui)乙(yi)醇(chun)II 30min-醇(chun)苯5-10min-I5-10min-II5-10min-蠟I1h-蠟II1h-蠟III 1h。
3、包(bao)埋:將浸好蠟(la)(la)(la)(la)的組織于(yu)包(bao)埋機內進行(xing)包(bao)埋。先(xian)將融化的蠟(la)(la)(la)(la)放(fang)入(ru)包(bao)埋框(kuang)(kuang),待蠟(la)(la)(la)(la)凝固之前將組織從(cong)脫水盒內取(qu)(qu)出按照(zhao)包(bao)埋面的要求(qiu)放(fang)入(ru)包(bao)埋框(kuang)(kuang)并(bing)貼上對應的標簽(qian)。于(yu)-20°凍(dong)臺冷卻,蠟(la)(la)(la)(la)凝固后(hou)將蠟(la)(la)(la)(la)塊(kuai)從(cong)包(bao)埋框(kuang)(kuang)中取(qu)(qu)出并(bing)修整蠟(la)(la)(la)(la)塊(kuai)。
4、切(qie)片:將(jiang)修整好的蠟(la)塊置于石蠟(la)切(qie)片機上(shang)切(qie)片,片厚4μm。切(qie)片漂(piao)浮于攤片機40℃溫水上(shang)將(jiang)組織展平(ping),用載玻片將(jiang)組織撈(lao)起,并放進60℃烘箱(xiang)內烤(kao)(kao)片。待(dai)水烤(kao)(kao)干蠟(la)烤(kao)(kao)化后取出常溫保存(cun)備用。
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