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主(zhu)營：外泌體,透射電(dian)鏡(jing),掃描電(dian)鏡(jing),石(shi)蠟切片等技術服務(wu)
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| 先生： |
點對點酵母雙雜交驗證實(shi)驗流(liu)程
1、誘餌(er)蛋白(bai)毒性(xing)及自激1活(huo)檢測；
2、共(gong)轉(zhuan)化：分別(bie)將誘餌/捕獲(huo)質(zhi)粒(li)（pGBKT7-Bait/pGADT7-Prey）、陽性對照(zhao)質(zhi)粒(li)（pGBKT7-p53/pGADT7-T）、陰性對照(zhao)質(zhi)粒(li)（pGBKT7-Lam/pGADT7-T）分別(bie)共(gong)轉(zhuan)到Y2H Gold感受態細胞中，涂(tu)布于DDO平板培養；
3、點板驗(yan)證：分(fen)別(bie)從平板上挑(tiao)單克1隆稀釋10倍、100倍、1000倍，然后點板到TDO/X/A和QDO/X/A固體培養基進行驗(yan)證；
4、實驗(yan)數據與報告(gao)整理。
菌落的裂(lie)解及DNA結合于纖維素濾膜
（1） 在一張(zhang)保鮮(xian)(xian)膜(mo)(mo)上制作一個裝有0.5mol/L NaOH的(de)小洼（0.75ml），使菌落面朝(chao)上，將濾膜(mo)(mo)放到小洼上，展(zhan)平保鮮(xian)(xian)膜(mo)(mo)，使濾膜(mo)(mo)均勻濕(shi)潤，讓濾膜(mo)(mo)留于原處2-3分鐘。
（2） 用干紙巾從濾(lv)膜(mo)的下方吸干濾(lv)膜(mo)，用一張新(xin)的保鮮(xian)膜(mo)和新(xin)配制(zhi)的0.5mol/L NaOH重復(fu)步驟（1）。
（3） 吸干濾(lv)(lv)膜，將(jiang)濾(lv)(lv)膜轉移到新的帶(dai)有1mol/L Tris·Cl(pH7.4）的保鮮膜洼上。5分鐘(zhong)后吸干濾(lv)(lv)膜，再重復一次該步驟。
（4） 吸(xi)干(gan)(gan)濾(lv)膜(mo)，把它轉(zhuan)移(yi)到有1.5mol/L NaCl、0.5mol/L Tris·Cl (pH7.4）的(de)保鮮膜(mo)小洼(wa)上5分(fen)鐘后吸(xi)干(gan)(gan)濾(lv)膜(mo)，轉(zhuan)移(yi)到一張干(gan)(gan)的(de)濾(lv)紙上，置(zhi)于室溫20-30分(fen)鐘，使濾(lv)膜(mo)干(gan)(gan)燥。
（5） 將濾膜夾在兩張干(gan)的濾紙之間(jian)，在真空烤(kao)(kao)箱中于80℃干(gan)烤(kao)(kao)2小時，固(gu)定DNA。
（6） 將固定在(zai)膜(mo)上(shang)的DNA與32 P標記的RNA進(jin)行雜交(jiao)。
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第3年
