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植物原位雜交的應用包括:
研究基因表(biao)達:通過觀(guan)察熒光(guang)信號的位(wei)置(zhi)和數量,可(ke)以(yi)確定(ding)目標基因在植物組織(zhi)中的表(biao)達模式和位(wei)置(zhi)。
染(ran)(ran)色(se)體定(ding)位(wei):將(jiang)目標(biao)基(ji)因與(yu)染(ran)(ran)色(se)體中的特(te)定(ding)位(wei)置進行(xing)比較(jiao),可以確定(ding)目標(biao)基(ji)因在染(ran)(ran)色(se)體中的位(wei)置和分布(bu)。
基(ji)(ji)因(yin):通過(guo)原位雜交技術,可以確定目標基(ji)(ji)因(yin)的序(xu)列(lie)和(he)位置,為基(ji)(ji)因(yin)提供重要的參考信息。
檢測物(wu)種或(huo)(huo)品(pin)種特(te)異性(xing):通過原位雜交技術(shu)可(ke)以檢測出不同物(wu)種或(huo)(huo)品(pin)種之間(jian)基因(yin)表達的差(cha)異,從而為物(wu)種或(huo)(huo)品(pin)種特(te)異性(xing)研究(jiu)提供依據。
遺傳育種(zhong):通過(guo)原位雜(za)交技術可以(yi)檢測出不同品種(zhong)之間基因(yin)表達的差異(yi),從而為遺傳育種(zhong)提供重要的參考信息(xi)。
同一樣本可(ke)以多次(ci)做原位雜交實驗(yan)嗎(ma)?
一(yi)般情況下,植物(wu)原位雜(za)交(jiao)(jiao),如(ru)果操作沒有得到理想的(de)結果,是可以將(jiang)探針洗滌然后進行再次的(de)雜(za)交(jiao)(jiao)的(de)。如(ru)果使用(yong)的(de)是直標型探針,還可以使用(yong)不(bu)同探針對同一(yi)樣(yang)本進行反復雜(za)交(jiao)(jiao)。針對不(bu)同的(de)樣(yang)本,處理方法略有不(bu)同。
原位(wei)雜交實操(cao)中哪些因素(su)比較(jiao)重(zhong)要?
重要的因素:溫度、光照、濕度和試劑的PH值。溫度和濕度直接影響著探針和目標DNA的雜交效率;光照影響著熒光染料的強度,所以探針要避光保存,其已經雜交的片子可用防熒光淬火劑封片且避光保存;各種試劑pH也要達到要求,這也直接關系到原位雜交的穩定性。
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