預雜交

1）每個管中(zhong)置換成大約300ulHYB－溶液(ye)，60℃水浴5分鐘，避免振蕩。

2）用等體積的HYB＋取代HYB－。

3）60℃水(shui)浴，預(yu)雜交4小時以上。

雜交

1）吸去預雜交的(de)HYB＋，加上100ul已加入(ru)探針的(de)HYB＋溶液（探針濃度(du)約為1ng/ul）..

2）60℃ 溫浴(yu)過夜(ye)。

 注：雜交與預雜交的溫度可以是55到60度不等，溫度越低，探針結合越好，溫度越高，植物組織原位雜交，背景越小。

原位雜交技術在許多領域(yu)都有(you)應(ying)用(yong)，以下(xia)是其中幾個具體應(ying)用(yong)：

細(xi)胞生物(wu)學(xue)(xue)和(he)發(fa)育(yu)生物(wu)學(xue)(xue)：在(zai)細(xi)胞生物(wu)學(xue)(xue)和(he)發(fa)育(yu)生物(wu)學(xue)(xue)領域，原位(wei)雜交技(ji)術常被用(yong)于研究基(ji)(ji)因的(de)表達和(he)定位(wei)。例如(ru)，通過標記特(te)定基(ji)(ji)因的(de)探針(zhen)，可以在(zai)細(xi)胞或組(zu)織中檢(jian)測特(te)定基(ji)(ji)因序列的(de)存在(zai)和(he)分(fen)布，進而了解基(ji)(ji)因在(zai)細(xi)胞分(fen)化、發(fa)育(yu)和(he)功能(neng)中的(de)作用(yong)。

基因(yin)組(zu)(zu)學(xue)和(he)(he)遺傳學(xue)研究：原位雜交技(ji)術也可用于基因(yin)組(zu)(zu)學(xue)和(he)(he)遺傳學(xue)研究。例如，通(tong)過標記多個基因(yin)探(tan)針(zhen)，可以(yi)檢(jian)測(ce)基因(yin)組(zu)(zu)中的(de)多個基因(yin)序列(lie)，從而進(jin)行基因(yin)定位、基因(yin)表(biao)達譜分(fen)析、基因(yin)突變(bian)檢(jian)測(ce)等研究。

病毒(du)(du)學(xue)和病原(yuan)微生物(wu)研究：在(zai)病毒(du)(du)學(xue)和病原(yuan)微生物(wu)學(xue)領(ling)域，原(yuan)位(wei)雜交(jiao)技術常被(bei)用于檢(jian)測和定(ding)位(wei)病毒(du)(du)、細(xi)菌等病原(yuan)微生物(wu)。例(li)如，通過標(biao)記特異性或核酸探針，可以(yi)檢(jian)測組織中病原(yuan)微生物(wu)的(de)存(cun)在(zai)、情況以(yi)及分布特征，從而為疾病的(de)預防、診斷和提供依據。

總之(zhi)，原(yuan)(yuan)位雜交技術(shu)(shu)在生(sheng)物學(xue)(xue)(xue)、醫學(xue)(xue)(xue)、基因組學(xue)(xue)(xue)、遺傳學(xue)(xue)(xue)、病(bing)毒(du)學(xue)(xue)(xue)和病(bing)原(yuan)(yuan)微生(sheng)物學(xue)(xue)(xue)等(deng)領域都有廣(guang)泛的應用價值，為人類認(ren)識生(sheng)命(ming)現象、探究疾病(bing)機制(zhi)和提供了有力的技術(shu)(shu)支持(chi)。

根據核酸探針標記物的種類分別進行自顯影或利用酶檢測系統進行不同顯色處理。細胞或組織的原位雜交切片在顯示后均可進行半定量的測定，如自顯影可利用人工或計算機輔助的圖象分析檢測儀（computer-assisted image analysis）檢測銀粒的數量和分布的差異。非性核酸探針雜交的細胞或組織可利用酶檢測系統顯色，然后利用顯微分光光度計或圖像分析儀對不同類型和數量的核酸的顯色強度進行檢測。

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