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點(dian)對(dui)點(dian)酵母雙雜交(jiao)驗證實驗流程
1、誘(you)餌蛋(dan)白毒性及(ji)自(zi)激(ji)1活檢測(ce);
2、共轉(zhuan)化:分別將誘(you)餌/捕獲質粒(pGBKT7-Bait/pGADT7-Prey)、陽性對照(zhao)質粒(pGBKT7-p53/pGADT7-T)、陰(yin)性對照(zhao)質粒(pGBKT7-Lam/pGADT7-T)分別共轉(zhuan)到Y2H Gold感受態細胞中(zhong),涂布于DDO平板培(pei)養(yang);
3、點(dian)板驗(yan)證(zheng):分別從平板上(shang)挑(tiao)單(dan)克1隆稀釋(shi)10倍、100倍、1000倍,然后點(dian)板到TDO/X/A和QDO/X/A固(gu)體培養基進(jin)行(xing)驗(yan)證(zheng);
4、實(shi)驗數據與報告整(zheng)理(li)。
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