外泌體(ti)研(yan)究(jiu)開展的(de)如(ru)火如(ru)荼(tu)。不論是 SCI 文章的(de)發表(biao)還是各類基1金(jin)的(de)申請，外泌體(ti)相關研(yan)究(jiu)表(biao)現都非(fei)常亮眼。外泌體(ti)提取(qu)后，研(yan)究(jiu)人(ren)員(yuan)面臨的(de)一個重要問題就是，我提取(qu)的(de)是不是外泌體(ti)？如(ru)果是的(de)話，質量如(ru)何？

現階(jie)段，對(dui)外泌(mi)體進行鑒(jian)定(ding)主要有三種主流(liu)的(de)方法：電(dian)(dian)鏡、粒徑和 Western blot 分(fen)析靶標物。之前我(wo)們已(yi)經對(dui)外泌(mi)體電(dian)(dian)鏡進行了總結，今天(tian)我(wo)們來(lai)看看外泌(mi)體的(de)粒徑分(fen)析。

外泌體粒徑分析原理

外泌體粒徑分析方法為納米顆粒跟蹤分析（Nanoparticle tracking Analysis， NT A)，外泌體粒徑及濃度檢測，其原理是對每個顆粒的布朗運動進行追1蹤和分析，結合 Stockes-Einstein 方程式計算出納米顆粒的流體力學直徑和濃度。NT A技術已被外泌體研究領域認可為外泌體表征手段之一。相較于其他表征方式，NT A技術的樣本處理更簡單、更能保證外泌體原始狀態、檢測速度更快。

外泌體可(ke)通過多種小分子進行修(xiu)飾，因此逐漸成(cheng)為(wei)遞(di)送(song)治(zhi)1療藥1物的(de)有效載體。研究發現，GRP78 在索拉菲尼(ni)耐(nai)藥癌細胞(bao)中(zhong)，相對于索拉菲尼(ni)敏(min)感癌細胞(bao)中(zhong)顯著(zhu)過表達，因此，可(ke)能是 HCC 治(zhi)1療的(de)潛(qian)在靶點。

在(zai)這項研究中(zhong)，錦(jin)州(zhou)醫(yi)學院趙亮課題組(zu)通過修(xiu)(xiu)飾(shi) BM-MSCs 以(yi)表(biao)達外(wai)泌(mi)體(ti)(ti) siGRP78，證(zheng)明(ming)了(le) siGRP78 修(xiu)(xiu)飾(shi)的(de)外(wai)泌(mi)體(ti)(ti)與(yu)索(suo)拉(la)1非尼聯合能夠靶向(xiang)肝細(xi)胞癌(ai)細(xi)胞中(zhong)的(de) GRP78 并(bing)抑制其生(sheng)長和(he)體(ti)(ti)外(wai)癌(ai)細(xi)胞的(de)侵(qin)襲。此外(wai)，siGRP78 修(xiu)(xiu)飾(shi)外(wai)泌(mi)體(ti)(ti)與(yu)索(suo)拉(la)1非尼聯合也抑制體(ti)(ti)內癌(ai)細(xi)胞的(de)生(sheng)長和(he)轉移(yi)。證(zheng)明(ming)了(le) siGRP78 修(xiu)(xiu)飾(shi)的(de)外(wai)泌(mi)體(ti)(ti)可以(yi)使索(suo)拉(la)1非尼耐藥(yao)的(de)癌(ai)細(xi)胞對索(suo)拉(la)1非尼敏(min)感并(bing)逆轉耐藥(yao)性。

除了用(yong)NTA方法(fa)，該團隊另基于(yu)acetylcholinesterase（一(yi)種(zhong)已(yi)知的(de)外(wai)泌(mi)體(ti)(ti)表達蛋白(bai)）評(ping)估三種(zhong)試(shi)劑盒(he)提取外(wai)泌(mi)體(ti)(ti)的(de)得(de)率。從NTA結果(guo)看，對(dui)于(yu)血(xue)1清和血(xue)漿樣本(ben)，Exo-spin的(de)提取量高，是其他兩種(zhong)試(shi)劑盒(he)的(de)1-3倍；相(xiang)對(dui)來說(shuo)，腦脊髓液的(de)提取率都比較(jiao)低(di)，ExoQuick?提取得(de)到(dao)的(de)外(wai)泌(mi)體(ti)(ti)濃度(du)低(di)。從基于(yu)acetylcholinesterase的(de)分析結果(guo)看，其數值高于(yu)NTA方法(fa)，且(qie)Exo-spin得(de)到(dao)的(de)外(wai)泌(mi)體(ti)(ti)濃度(du)高于(yu)其他兩種(zhong)試(shi)劑盒(he)。