以(yi)(yi)菌落(luo)原位雜(za)交為例(li)：對(dui)分散在若(ruo)干個瓊脂(zhi)平(ping)(ping)板上(shang)的少數菌落(luo)（100-200）進(jin)行篩選時(shi)，可(ke)采(cai)用該方法。將這些菌落(luo)歸(gui)并(bing)到一個瓊脂(zhi)主平(ping)(ping)板以(yi)(yi)及已(yi)置于第(di)二個瓊脂(zhi)平(ping)(ping)板表面的一張纖維(wei)素濾膜上(shang)。經培養一段時(shi)間后，對(dui)菌落(luo)進(jin)行原位裂(lie)解。主平(ping)(ping)板應貯存于4℃直(zhi)至得到篩選結果(guo)。

將少數菌落轉移到纖維素濾膜(mo)上

（1） 在含有選擇(ze)性的瓊脂(zhi)平板上放一張(zhang)纖(xian)維(wei)素濾膜。

（2） 用無菌牙簽將各個(ge)菌落先轉(zhuan)移至濾(lv)膜上，再轉(zhuan)移至含(han)有選擇性但未放濾(lv)膜的(de)瓊脂主(zhu)平(ping)板(ban)上。應按(an)一(yi)定的(de)格子進(jin)行(xing)劃(hua)線接種（或(huo)打點）。每(mei)菌落應分(fen)別(bie)劃(hua)線于兩個(ge)平(ping)板(ban)的(de)相同位置上。后，在濾(lv)膜和主(zhu)平(ping)板(ban)上同時劃(hua)一(yi)個(ge)含(han)有非重組質粒的(de)菌落。

（3） 倒(dao)置平(ping)板，于37℃培養至(zhi)劃線(xian)的細菌(jun)菌(jun)落生長到0.5-1.0mm的寬度。

（4） 用已裝(zhuang)防(fang)水黑色繪圖墨水的(de)針頭穿透濾(lv)膜直至瓊脂，在3個以(yi)上的(de)不對稱(cheng)位置作標記(ji)(ji)。在主平板大致相同的(de)位置上也作上標記(ji)(ji)。

（5） 用Parafilm膜(mo)封(feng)好主平板，倒置(zhi)貯放于(yu)4℃，直至(zhi)獲得雜交反(fan)應的(de)結果。

（6） 裂(lie)解(jie)細菌(jun)，按本(ben)段下面所述方法，使釋放的DNA結合(he)于纖(xian)維(wei)素濾膜。

植(zhi)物組織原(yuan)(yuan)位(wei)雜交(jiao)(jiao)是一(yi)種重(zhong)要(yao)的分子生物學技(ji)術，它可以用(yong)來(lai)研究植(zhi)物基因的表達和調(diao)控。該技(ji)術利用(yong)DNA探針與目標組織中的RNA或DNA結合，從而確定目標基因的表達模式和位(wei)置。本(ben)文將介(jie)紹植(zhi)物組織原(yuan)(yuan)位(wei)雜交(jiao)(jiao)的原(yuan)(yuan)理、步驟(zou)和應用(yong)。

原理

植物組織原位雜交的原理是利用DNA探針與目標組織中的RNA或DNA結合，動物組織原位雜交，從而確定目標基因的表達模式和位置。DNA探針是一段已知序列的DNA分子，可以與目標RNA或DNA的互補序列結合。在組織原位雜交中，DNA探針通常標記有熒光染料或性同位素，以便于檢測。

原位雜交技術是一種在生物組織或細胞中定位DNA片段或RNA序列的重要生物技術，具有廣泛的應用前景。該技術在醫學、農業和工業等領域都有廣泛的應用，可以幫助人們深入理解基因表達和遺傳特征，為疾病的診斷和、品種的鑒定和遺傳育種以及產品安全性和穩定性的檢測提供有效手段。隨著科技的不斷發展，原位雜交技術的應用前景將更加廣闊，為生命科學和醫學等領域的研究提供更多可能性。

動物組織原位雜交-貝科新肽(圖)由武漢貝科新肽科技有限公司提供。武漢貝科新肽科技有限公司為客戶提供“原位雜交,亞細胞定位,蛋白互作,啟動子篩選”等業務，公司擁有“原位雜交,亞細胞定位,蛋白互作,啟動子篩選”等品牌，專注于化學試劑等行業。，在湖北省武漢市洪山區關山大道289號紫菘逸景華庭二期109棟2層2002-3號的名聲不錯。歡迎來電垂詢，聯系人：夏先生。