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全自動核酸提取儀(yi)的作用
隨著分子生(sheng)物學技術的(de)(de)高速發展,以(yi)核(he)(he)酸(suan)雜交、核(he)(he)酸(suan)擴增及核(he)(he)酸(suan)序列(lie)分析等為代表(biao)的(de)(de)分子診斷和檢測技術的(de)(de)重要作用(yong)日(ri)益凸顯。樣品前處理(li)所花費的(de)(de)時間占(zhan)整個分析過程的(de)(de)60%,全自動核(he)(he)酸(suan)提取儀器,而檢測誤差的(de)(de)90%出現在前處理(li)領域。核(he)(he)酸(suan)提取作為分子診斷實驗(yan)關鍵(jian)的(de)(de)一步,其獲得的(de)(de)核(he)(he)酸(suan)質量優劣直接影響到下游分子生(sheng)物學試驗(yan)的(de)(de)成敗。
全自動核酸(suan)提(ti)取儀的(de)提(ti)取原理
采(cai)用(yong)離(li)心(xin)柱法(fa)(fa)的(de)儀器:離(li)心(xin)柱法(fa)(fa)核酸提(ti)取(qu)儀主(zhu)要(yao)采(cai)用(yong)離(li)心(xin)機和(he)自動(dong)(dong)移液裝(zhuang)置相結合的(de)方法(fa)(fa),通量(liang)一般(ban)在1-12個樣本(ben),操作時間(jian)和(he)手工提(ti)取(qu)差不(bu)多,并(bing)不(bu)能提(ti)高實際工作效率,且價格昂貴,全自動(dong)(dong)核酸提(ti)取(qu)儀器報價,不(bu)同型(xing)號儀器的(de)耗材(cai)也不(bu)能通用(yong),僅適合經(jing)費(fei)充足的(de)大型(xing)實驗室使用(yong)。
采用(yong)磁(ci)珠法的(de)(de)儀器:以(yi)磁(ci)珠為載體,利用(yong)磁(ci)珠在(zai)(zai)高鹽低PH值下吸附核酸(suan),全自動核酸(suan)提(ti)(ti)取儀器廠(chang)家,在(zai)(zai)低鹽高PH值下與核酸(suan)分離的(de)(de)原理,再通過移動磁(ci)珠或轉(zhuan)移液體來實(shi)現(xian)核酸(suan)的(de)(de)整個提(ti)(ti)取純化過程。由于其(qi)原理的(de)(de)特別性,所(suo)以(yi)可(ke)設計(ji)成很(hen)多種通量,既可(ke)以(yi)單管(guan)提(ti)(ti)取,也可(ke)以(yi)提(ti)(ti)取8-96個樣(yang)本,且(qie)其(qi)操作簡單快捷,一批次上機提(ti)(ti)取時間為9~40min(不(bu)(bu)同(tong)(tong)樣(yang)本不(bu)(bu)同(tong)(tong)廠(chang)家時間不(bu)(bu)同(tong)(tong)),大大提(ti)(ti)高了實(shi)驗效率,且(qie)成本低廉,因而可(ke)以(yi)在(zai)(zai)不(bu)(bu)同(tong)(tong)實(shi)驗室(shi)使用(yong),是目前市場上的(de)(de)主流儀器。
全自動核酸提取儀如何操作呢?
核(he)酸(suan)提取(qu)儀配(pei)套試劑及其(qi)操作步(bu)驟,買了儀器后一(yi)定要(yao)考慮后續(xu)使用配(pei)套試劑的問題(ti):
1)配套試(shi)(shi)劑是否齊(qi)全(quan)。不同樣(yang)本類型的提(ti)取試(shi)(shi)劑盒(he)產品鏈是否完整
2)配套試(shi)劑是不是預封裝(zhuang)。非預封裝(zhuang)的試(shi)劑需要實驗員(yuan)用移(yi)液(ye)器加入裂解液(ye)、洗滌液(ye)和洗脫液(ye)等試(shi)劑,并沒(mei)有減少人工操作(zuo)時間;
3)提取前(qian)除了加(jia)樣(yang)(yang)本外。是否需要添加(jia)蛋(dan)(dan)白(bai)酶(mei)K,由(you)于(yu)有些公司并沒有掌握裂解(jie)液(ye)中預(yu)封裝蛋(dan)(dan)白(bai)酶(mei)K且(qie)常溫儲存的(de)技術,蛋(dan)(dan)白(bai)酶(mei)K需要-20℃單獨保(bao)存,需即用即加(jia)。每個(ge)樣(yang)(yang)本多加(jia)一(yi)步(bu)蛋(dan)(dan)白(bai)酶(mei)K,96個(ge)樣(yang)(yang)本多了10~15min左右的(de)操作時間。
4)配(pei)套試劑(ji)的(de)保(bao)存(cun)(cun)溫度(du)。有些廠家的(de)提(ti)取(qu)試劑(ji)需(xu)要(yao)在2—8℃運(yun)輸(shu)(shu)保(bao)存(cun)(cun),冷(leng)鏈運(yun)輸(shu)(shu)增(zeng)加運(yun)輸(shu)(shu)成(cheng)本,保(bao)存(cun)(cun)需(xu)要(yao)在冰箱中,而預封(feng)裝提(ti)取(qu)試劑(ji)體積(ji)較(jiao)大,在用(yong)量(liang)大特別像新冠這(zhe)樣大批量(liang)的(de)使用(yong),完全沒有足夠冰箱可以(yi)進(jin)行一段時間試劑(ji)的(de)儲存(cun)(cun)空間。
5)提取(qu)后的擴增效率(lv)。提取(qu)核酸時觀察磁珠(zhu)殘留率(lv)并且檢測提取(qu)核酸質量!
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