原位雜交公司-武漢貝科新肽公司-原位雜交

||| 產品編號：590731363 更新時間：2025-01-19

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RNA原位核酸雜交又稱RNA原位雜交組織化學或RNA原位雜交。該技術是指運用cRNA或寡核苷酸等探針檢測細胞和組織內RNA表達的一種原位雜交技術。其基本原理是：在細胞或組織結構保持不變的條件下，用標記的已知的RNA核苷酸片段，原位雜交檢測，按核酸雜交中堿基配對原則，與待測細胞或組織中相應的基因片段相結合(雜交)，所形成的雜交體(Hybrids)經顯色反應后在光學顯微鏡或電子顯微鏡下觀察其細胞內相應的mRNA、rRNA和tRNA分子。RNA原位雜交技術經不斷改進，其應用的領域已遠超出DNA原位雜交技術。尤其在基因分析和診斷方面能作定性、定位和定量分析，已成為有效的分子病理學技術，同時在分析低豐度和罕見的mRNA表達方面已展示了分子生物學的一重要方向。

原位(wei)雜交是一種非常重(zhong)要的技術，因(yin)為它(ta)可(ke)(ke)以(yi)在(zai)細(xi)胞(bao)(bao)或組織(zhi)的自然環境中(zhong)(zhong)研究基因(yin)表達和(he)(he)調(diao)控(kong)。它(ta)可(ke)(ke)以(yi)幫助科學家們了解基因(yin)在(zai)特定組織(zhi)或細(xi)胞(bao)(bao)類型中(zhong)(zhong)的作用和(he)(he)功能，以(yi)及(ji)(ji)在(zai)疾(ji)病發生(sheng)和(he)(he)發展過程(cheng)中(zhong)(zhong)的變(bian)化。此外，這項(xiang)技術還可(ke)(ke)以(yi)用于檢測基因(yin)變(bian)異和(he)(he)染色體異常，以(yi)及(ji)(ji)監測細(xi)胞(bao)(bao)生(sheng)長和(he)(he)凋(diao)亡(wang)。

雖然原(yuan)位雜(za)(za)交(jiao)是一(yi)項非常有用的(de)(de)(de)(de)技(ji)(ji)術(shu)，但(dan)它也(ye)有一(yi)些限(xian)制。首先，探(tan)針的(de)(de)(de)(de)特(te)異性可能(neng)受(shou)到干擾(rao)，導致錯誤的(de)(de)(de)(de)結果。其次，探(tan)針的(de)(de)(de)(de)數量和(he)位置可能(neng)受(shou)到細胞或組(zu)織中其他成分(fen)的(de)(de)(de)(de)影響。此外(wai)，這項技(ji)(ji)術(shu)的(de)(de)(de)(de)操(cao)作(zuo)比較繁瑣，原(yuan)位雜(za)(za)交(jiao)服務，需要(yao)專門的(de)(de)(de)(de)技(ji)(ji)術(shu)和(he)設備，而且需要(yao)大量的(de)(de)(de)(de)實(shi)驗和(he)對照才能(neng)獲得(de)可靠的(de)(de)(de)(de)結果。

原位雜交第三天

1）用1ml含10％熱滅清的MABT溶(rong)(rong)液(ye)(ye)置(zhi)換(huan)(huan)溶(rong)(rong)液(ye)(ye)，放置(zhi)搖床上25分(fen)(fen)鐘，然后用1mlMABT置(zhi)換(huan)(huan)，25分(fen)(fen)鐘，再用1mlMABT溶(rong)(rong)液(ye)(ye)置(zhi)換(huan)(huan)，一小時以上，后用1mlMABT溶(rong)(rong)液(ye)(ye)置(zhi)換(huan)(huan)，原(yuan)位雜(za)交(jiao)公(gong)司，25分(fen)(fen)鐘。

2）用1ml 1mM左旋(xuan)米睉的(de)Staining buffer洗三(san)次，每(mei)次放置五分(fen)鐘。

3）將(jiang)胚胎轉入(ru)十六(liu)孔板(ban)中，吸去staining buffer，加(jia)(jia)上(shang)300ul BM Purple AP Substrate(底物(wu)，用之前加(jia)(jia)5mM左旋米(mi)唑)，原位(wei)雜(za)交，十六(liu)孔板(ban)外面包上(shang)錫箔紙以(yi)避光(guang)，避免(mian)搖動，室溫下顯色。

4）每(mei)隔一小時(shi)觀(guan)察(cha)胚胎是(shi)否開始顯色

5）將顯色完(wan)全(quan)的胚胎(tai)中的底物吸出，用PBST洗兩三次后加(jia)上4％多聚甲醛(quan)固定，拍照。

6）4C冰箱保存。

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