將32 P標記的雙鏈DNA探(tan)針于(yu)100℃加熱5分鐘，迅速置(zhi)于(yu)冰浴中。單鏈探(tan)針不必變性。將探(tan)針加到雜(za)交袋中雜(za)交過夜。雜(za)交期間，盛(sheng)濾膜的容器應蓋(gai)嚴，以防液體蒸發。

雜(za)交結(jie)束后，去除雜(za)交液，立即于室溫把濾膜(mo)放(fang)入大體積（300-500ml）的2×SSC和0.1% SDS溶液中(zhong)，輕(qing)輕(qing)振搖5分鐘，并將濾膜(mo)至少翻轉一次。重(zhong)復(fu)洗(xi) 一次，同(tong)時應(ying)避(bi)免膜(mo)干涸。

68℃用300-500ml 1×SSC和0.1% SDS溶液洗膜兩次，每次1-1.5小時。此時已可進行自顯影。如背景很高或實驗要求嚴格的洗膜條件，可用300-500ml 0.2×SSC和0.1% SDS的溶液于68℃將濾膜浸泡60分鐘。

原位雜(za)(za)交技術(shu)的(de)(de)(de)定(ding)義和基本(ben)原理原位雜(za)(za)交技術(shu)是(shi)(shi)一種基于核(he)酸分子雜(za)(za)交原理，將標(biao)(biao)記的(de)(de)(de)核(he)酸探針(zhen)與(yu)(yu)生(sheng)物組織或細(xi)(xi)(xi)胞中的(de)(de)(de)DNA或RNA進行特(te)異性結合，從而在細(xi)(xi)(xi)胞水平上檢(jian)測目標(biao)(biao)核(he)酸序(xu)列分布的(de)(de)(de)技術(shu)。原位雜(za)(za)交技術(shu)的(de)(de)(de)基本(ben)原理是(shi)(shi)利(li)用DNA或RNA的(de)(de)(de)互補性，通過(guo)加熱或化學(xue)反應使探針(zhen)與(yu)(yu)組織或細(xi)(xi)(xi)胞中的(de)(de)(de)目標(biao)(biao)核(he)酸序(xu)列形成雙(shuang)鏈復合物，進而實現(xian)目標(biao)(biao)核(he)酸序(xu)列的(de)(de)(de)定(ding)位。

原(yuan)位雜交(jiao)的(de)(de)基(ji)本原(yuan)理是利用標記的(de)(de)核酸探針(zhen)與細胞(bao)或組(zu)織中(zhong)(zhong)的(de)(de)DNA或RNA進行雜交(jiao)，然后通過檢測標記來識別探針(zhen)的(de)(de)位置。這使(shi)得研究人員(yuan)能夠(gou)在細胞(bao)或組(zu)織中(zhong)(zhong)確定特定基(ji)因(yin)或基(ji)因(yin)組(zu)區域(yu)的(de)(de)位置和表達水平。

原位雜交(jiao)可(ke)以(yi)用于(yu)多(duo)種(zhong)類型的實驗。例如，它可(ke)以(yi)用來檢(jian)測特定基因在發(fa)育過程中的表達模(mo)式，或者確定特定基因變異在細胞中的分布。此外，原位雜交(jiao)還(huan)可(ke)以(yi)用于(yu)診斷疾病，例如某(mou)些(xie)類型的，以(yi)及監測效果(guo)。