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湖北熒光原位雜交-貝科新肽(推薦商家)

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植(zhi)物組(zu)織原位雜交(jiao)(jiao)技術在植(zhi)物基因表(biao)達和調控(kong)研(yan)究(jiu)中具(ju)有廣泛(fan)的(de)(de)應用。它可(ke)(ke)以用來研(yan)究(jiu)植(zhi)物發育、生長、逆(ni)境響應等(deng)方面的(de)(de)基因表(biao)達模式和調控(kong)機制。例如,可(ke)(ke)以利用該技術研(yan)究(jiu)植(zhi)物中的(de)(de)轉錄因子(zi)、信號轉導(dao)通路、代謝(xie)途徑等(deng)基因的(de)(de)表(biao)達和調控(kong)。此外,植(zhi)物組(zu)織原位雜交(jiao)(jiao)技術還(huan)可(ke)(ke)以用來鑒(jian)定植(zhi)物中的(de)(de)病(bing)原體、檢測植(zhi)物等(deng)方面。

總之植物(wu)組織(zhi)原(yuan)位雜交技術是一種重要的(de)分子生(sheng)物(wu)學技術,可以用來(lai)研(yan)究植物(wu)基因的(de)表達和調控。它具有操作簡便、結果可靠、應用廣(guang)泛等優點,是植物(wu)分子生(sheng)物(wu)學研(yan)究中不可或缺(que)的(de)工具。

菌(jun)落(luo)的裂解及DNA結合于纖維素濾(lv)膜

(1) 在(zai)一張保(bao)鮮(xian)膜上(shang)制(zhi)作一個(ge)裝(zhuang)有0.5mol/L NaOH的小(xiao)洼(wa)(wa)(0.75ml),使(shi)菌落面朝上(shang),將濾膜放到小(xiao)洼(wa)(wa)上(shang),展平保(bao)鮮(xian)膜,使(shi)濾膜均勻濕潤(run),讓濾膜留于原處2-3分鐘。

(2) 用干紙巾從濾膜(mo)的下方吸(xi)干濾膜(mo),用一張新的保鮮膜(mo)和新配制的0.5mol/L NaOH重復步(bu)驟(1)。

(3) 吸干濾膜,將濾膜轉移到新的(de)帶(dai)有1mol/L Tris·Cl(pH7.4)的(de)保鮮膜洼上。5分鐘后吸干濾膜,再重復一(yi)次該(gai)步驟。

(4) 吸(xi)干濾(lv)(lv)膜,把它轉移到有1.5mol/L NaCl、0.5mol/L Tris·Cl (pH7.4)的保鮮膜小洼上(shang)5分鐘后吸(xi)干濾(lv)(lv)膜,轉移到一(yi)張干的濾(lv)(lv)紙上(shang),置于室溫20-30分鐘,使濾(lv)(lv)膜干燥。

(5) 將(jiang)濾膜夾在(zai)兩張干的濾紙(zhi)之間,熒光原位雜交,在(zai)真空烤(kao)箱中于80℃干烤(kao)2小時,固定DNA。

(6) 將固定在膜上的DNA與32 P標記的RNA進行雜交。

原位雜交技術是在一定的溫度和離子濃度下,使具有特異序列的單鏈探針通過堿基互補規則與組織細胞內待測的核酸復性結合而使得組織細胞中的特異性核酸得到定位,并通過探針上所標記的檢測系統將其在核酸的原有位置上顯示出來。經特定標記的核苷酸鏈為探針,可與組織切片、細胞或染色體標本中的待檢DNA片段或mRNA進行雜交,然后顯示標記物,從而分析待檢核酸的分布和含量。利用此項技術可研究各種基因在染色體上的定位,編碼某種蛋白質的mRNA在胞質中的表達。

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