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原位雜交檢測-原位雜交-貝科新肽科技公司(查看)

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原位雜交是一種強大的技術,它使研究人員能夠在細胞或組織中確定特定DNA或RNA序列的位置。這項技術在基礎研究和臨床應用中都有廣泛的應用。通過了解原位雜交的基本原理和實驗步驟,原位雜交檢測,研究人員可以更好地理解其功能并應用于他們的研究中。

原(yuan)(yuan)(yuan)位(wei)雜交(jiao)技術的(de)(de)定(ding)義(yi)和基(ji)本(ben)原(yuan)(yuan)(yuan)理(li)(li)原(yuan)(yuan)(yuan)位(wei)雜交(jiao)技術是一(yi)種基(ji)于核(he)酸分子雜交(jiao)原(yuan)(yuan)(yuan)理(li)(li),將標記的(de)(de)核(he)酸探針與(yu)生物組織(zhi)或(huo)(huo)細胞(bao)(bao)中(zhong)的(de)(de)DNA或(huo)(huo)RNA進(jin)行特異性結合,從而在細胞(bao)(bao)水平上(shang)檢(jian)測(ce)目標核(he)酸序(xu)列分布的(de)(de)技術。原(yuan)(yuan)(yuan)位(wei)雜交(jiao)技術的(de)(de)基(ji)本(ben)原(yuan)(yuan)(yuan)理(li)(li)是利用DNA或(huo)(huo)RNA的(de)(de)互補性,通過加熱(re)或(huo)(huo)化學反應(ying)使探針與(yu)組織(zhi)或(huo)(huo)細胞(bao)(bao)中(zhong)的(de)(de)目標核(he)酸序(xu)列形(xing)成雙鏈復合物,進(jin)而實(shi)現目標核(he)酸序(xu)列的(de)(de)定(ding)位(wei)。

基因組原位雜交技術基因組原位雜交(Genome in situ hybridization,原位雜交,GISH)技術是20世紀80年代末發展起來的一種原位雜交技術。它主要是利用物種之間DNA同源性的差異,用另一物種的基因組DNA以適當的濃度作封阻,在靶染色體上進行原位雜交。GISH技術初應用于動物方面的研究(Pinkel et al.,熒光原位雜交,1986),在植物上早應用于小麥和栽培種的鑒定(余舜武等 2001;王文奎等 2000)。

FISH技術的基本步驟包括探針制備、樣品預處理、探針與樣品的雜交、信號檢測和圖像分析等。在探針制備過程中,使用熒光標記物代替同位素標記物來標記探針。在樣品預處理過程中,細胞或組織的固定、裂解和去除非特異性蛋白質等操作都是必要的,植物原位雜交,以提高探針與目標序列的親和力和特異性。在探針與樣品的雜交過程中,探針與樣品中的目標序列進行互補性雜交,形成可檢測的熒光信號。在信號檢測和圖像分析過程中,使用高靈敏度熒光顯微鏡檢測熒光信號并獲取高分辨率的細胞圖像。

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