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植物染色體原位雜交檢測服務-科銳諾生物科技

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隨著分子病理技術的蓬勃發展,越來越多的疾病相關分子改變被發現并逐步應用于臨床實踐中。自21世紀以來,分子病理診斷逐漸受到我國病理學工作者的認可和重視,并逐步在大醫院病理科開展起來,特別是在遺傳性疾病、感1染性疾病、腫1瘤等方面分子病理診斷已取得了長足的進步。 目前,我國已穩定開展的分子病理技術主要有顯色原位雜交、熒光原位雜交、PCR、熒光定量PCR、基因芯片和DNA測序技術。

染色體(ti)原(yuan)(yuan)位雜交實驗的基(ji)本原(yuan)(yuan)理(li)是(shi)利用特定標記的已知堿基(ji)序(xu)列(lie)的核酸(suan)探針,依據(ju)堿基(ji)互(hu)補配對(dui)原(yuan)(yuan)理(li),植(zhi)物染色體(ti)原(yuan)(yuan)位雜交檢(jian)測(ce)服務(wu),與中(zhong)期染色體(ti)玻片標本中(zhong)的同源 DNA 序(xu)列(lie)進行雜交。

標記可以(yi)用放(fang)(fang)1射(she)性(xing)(xing)同(tong)位素(3H、35S、32P),然(ran)后進(jin)行放(fang)(fang)1射(she)自顯(xian)(xian)影;也可以(yi)用非放(fang)(fang)1射(she)性(xing)(xing)的熒光素生物素、地(di)1高辛,再(zai)用熒光顯(xian)(xian)微(wei)鏡進(jin)行觀察,即熒光原位雜交(fluorescent in situhybridization,FISH)技術。

原位雜交第三天

1) 用(yong)(yong)(yong)1ml含10%熱(re)滅清(qing)的MABT溶液置(zhi)(zhi)(zhi)換(huan)溶液,放置(zhi)(zhi)(zhi)搖床(chuang)上(shang)25分(fen)鐘,然后(hou)用(yong)(yong)(yong)1mlMABT置(zhi)(zhi)(zhi)換(huan),25分(fen)鐘,再用(yong)(yong)(yong)1mlMABT溶液置(zhi)(zhi)(zhi)換(huan),一小時以上(shang),后(hou)用(yong)(yong)(yong)1mlMABT溶液置(zhi)(zhi)(zhi)換(huan),25分(fen)鐘。

2) 用(yong)1ml 1mM左(zuo)旋米睉的(de)Staining buffer洗三次,每次放置五分鐘(zhong)。

3)將胚胎轉(zhuan)入十六孔(kong)板(ban)中,吸去staining buffer,加上300ul BM Purple AP Substrate(底物,用(yong)之前加5mM左(zuo)旋米唑),十六孔(kong)板(ban)外面包上錫箔(bo)紙以避(bi)(bi)光(guang),避(bi)(bi)免搖(yao)動,室溫下顯色。

4)每(mei)隔一小(xiao)時觀(guan)察(cha)胚胎(tai)是否開(kai)始顯色

5)將顯色完全的胚胎中的底物(wu)吸(xi)出,用PBST洗兩(liang)三次后(hou)加上4%多聚甲醛固定,拍(pai)照(zhao)。

6)4C冰箱保存。

植物染色體原位雜交檢測服務-科銳諾生物科技由武漢科銳諾生物科技有限公司提供。武漢科銳諾生物科技有限公司為客戶提供“外泌體,透射電鏡,掃描電鏡,石蠟切片等技術服務”等業務,公司擁有“科銳諾”等品牌,專注于技術合作等行業。,在湖北省武漢市江夏區神墩四路666號武漢國英種子A棟1樓的名聲不錯。歡迎來電垂詢,聯系人:王經理。

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