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科銳諾生物(多圖)-分子病理技術服務

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分子病(bing)(bing)(bing)理學(xue)(xue)是(shi)與分子生(sheng)(sheng)物學(xue)(xue)、細(xi)胞(bao)遺傳學(xue)(xue)等(deng)學(xue)(xue)科(ke)相互滲透(tou),在蛋白(bai)質和(he)核酸等(deng)生(sheng)(sheng)物大分子水(shui)平上研(yan)究(jiu)(jiu)(jiu)疾病(bing)(bing)(bing)病(bing)(bing)(bing)因(yin)、發病(bing)(bing)(bing)機制、形態變(bian)化及功能損害等(deng)方面(mian)發生(sheng)(sheng)和(he)發展規律(lv)的新的分支學(xue)(xue)科(ke),對(dui)疾病(bing)(bing)(bing)的病(bing)(bing)(bing)因(yin)、發展、發病(bing)(bing)(bing)機制及形態變(bian)化,從傳統形態學(xue)(xue)概念深入至(zhi)分子或基(ji)因(yin)水(shui)平,分子病(bing)(bing)(bing)理已成為腫1瘤(liu)病(bing)(bing)(bing)理研(yan)究(jiu)(jiu)(jiu)中(zhong)重要的內容和(he)手(shou)段。①細(xi)胞(bao)特異性mRNA轉(zhuan)錄的定(ding)位,可用于基(ji)因(yin)圖(tu)譜,基(ji)因(yin)表達(da)和(he)基(ji)因(yin)組進化的研(yan)究(jiu)(jiu)(jiu);

原位雜交是在分子生物學領域應用極為廣泛的實驗技術之一,是在研究生物體發育過程中的一種極為重要的分子遺傳學的研究方法。其英文名為insitu hybridization,其中in situ為拉丁文,字面的意思理解就是說在其原來的天然的位置處雜交。用已標記的核酸探針與組織切片或細胞中的待測核酸中的互補序列雜交, 從而對組織細胞中的核酸進行定性、定位和相對定量分析。是一種直接、簡便的研究基因定位和表達的方法。基本原理--堿基互補配對原理

既要充分保(bao)留(liu)被(bei)(bei)測核酸,(特別(bie)是RNA)不被(bei)(bei)降解(jie),又(you)要盡可(ke)能維持原有組(zu)織或細(xi)胞(bao)的(de)形態結構。

步驟:基(ji)本與(yu)免(mian)1疫組織(zhi)化學技術相似,即組織(zhi)要求(qiu)新鮮(xian)和迅(xun)速投入固定(ding)液(ye)。固定(ding)液(ye)為4%多(duo)聚(ju)甲醛/0.1 M PBS(PH7.0-7.6),含有1/1000 DEPC。標(biao)(biao)本較大時(shi)(shi)(shi)(shi)用刀片切成厚度不超(chao)(chao)(chao)過(guo)4mm的小(xiao)塊,分(fen)子病理技術服務,固定(ding)1小(xiao)時(shi)(shi)(shi)(shi)即可(ke),較大的標(biao)(biao)本固定(ding)不要超(chao)(chao)(chao)過(guo)2小(xiao)時(shi)(shi)(shi)(shi)。某些(xie)組織(zhi)對過(guo)度固定(ding)尤其敏感,如動物大腦,固定(ding)時(shi)(shi)(shi)(shi)間30-40分(fen)鐘,一般不要超(chao)(chao)(chao)過(guo)1小(xiao)時(shi)(shi)(shi)(shi)。取材過(guo)程中避免(mian)手指(zhi)、唾液(ye)和未經RNA酶抑制處理的器具接觸標(biao)(biao)本。冷凍切片以厚5~30um佳(jia),40℃烤箱(xiang)內干燥2小(xiao)時(shi)(shi)(shi)(shi)后儲存(cun)在(zai)-80℃超(chao)(chao)(chao)低溫冰箱(xiang),在(zai)-20℃可(ke)保(bao)存(cun)2~3周,在(zai)-70℃可(ke)保(bao)存(cun)數(shu)月之久。

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