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染色體熒光原位雜交-原位雜交-貝科新肽科技公司(查看)

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原位雜(za)交(In situ hybridazation)

固定

收集斑馬魚的(de)胚(pei)(pei)胎(tai),在Holfretor水中培(pei)養(yang),熒光原位雜(za)交(jiao),到達所需(xu)要(yao)的(de)發(fa)育(yu)時期時,用蛋白酶(mei)去除(chu)卵膜,用4%多聚甲醛(quan)固(gu)定(ding),在4℃保(bao)存,二(er)十四小時后用50%2%多聚甲醛(quan)溶(rong)液洗(xi),原位雜(za)交(jiao),然后換(huan)成,在-20C 保(bao)存,待用(兩(liang)天和兩(liang)天以上的(de)胚(pei)(pei)胎(tai)需(xu)要(yao)用處(chu)理,去除(chu)色素。或者(zhe)使(shi)用苯(ben)锍脲稀溶(rong)液培(pei)養(yang),可阻斷色素的(de)形成)

這一原理對于檢測一個特異的mRNA在某一種生物體,或者某些組織切片、單個細胞里具體表達位置非常有用。該技術早應用于60年代末期,由于核酸分子雜交的特異性高,并可定位,因此該技術已被廣泛應用,例如與細胞內RNA進行雜交以觀察該組織細胞中特定基因表達水平。原位雜交能在成分復雜的組織中進行單一細胞的研究而不受同一組織中其他成分的影響,因此對于那些細胞數量少且散在于其他組織中的細胞內DNA或RNA研究更為方便;同時由于原位雜交不需要從組織中提取核酸,對于組織中含量極低的靶序列有極高的敏感性,原位雜交檢測,并可完整地保持組織與細胞的形態,染色體熒光原位雜交,更能準確地反映出組織細胞的相互關系及功能狀態。

植物原位(wei)雜交在(zai)遺傳育種方面的應用(yong)主要包括(kuo):

異(yi)源(yuan)染(ran)(ran)色質(zhi)及多種(zhong)染(ran)(ran)色體畸變檢測:通過遠緣雜交把有(you)用遺傳物(wu)質(zhi)基因(yin)的(de)異(yi)源(yuan)染(ran)(ran)色質(zhi)漸滲到(dao)植物(wu)中(zhong)。如帶(dai)有(you)幾種(zhong)抗病基因(yin)的(de)黑麥(mai)1R染(ran)(ran)色體已被整合(he)到(dao)許多高(gao)產的(de)小(xiao)麥(mai)品種(zhong)中(zhong)。原位雜交技術(shu)則是鑒定外源(yuan)染(ran)(ran)色體(質(zhi))的(de)有(you)效(xiao)手(shou)段(duan)。

基因組印記研究:基因組印記是指一個基因的兩條染色體上的DNA序列存在差異。通過植物原位雜交技術,可以檢測到基因組印記的存在和分布,從而幫助確定基因組的進化、遺傳和功能特征。

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