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原位雜(za)交(In situ hybridazation)
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收集斑馬魚的(de)胚(pei)(pei)胎(tai),在Holfretor水中培(pei)養(yang),熒光原位雜(za)交(jiao),到達所需(xu)要(yao)的(de)發(fa)育(yu)時期時,用蛋白酶(mei)去除(chu)卵膜,用4%多聚甲醛(quan)固(gu)定(ding),在4℃保(bao)存,二(er)十四小時后用50%2%多聚甲醛(quan)溶(rong)液洗(xi),原位雜(za)交(jiao),然后換(huan)成,在-20C 保(bao)存,待用(兩(liang)天和兩(liang)天以上的(de)胚(pei)(pei)胎(tai)需(xu)要(yao)用處(chu)理,去除(chu)色素。或者(zhe)使(shi)用苯(ben)锍脲稀溶(rong)液培(pei)養(yang),可阻斷色素的(de)形成)
植物原位(wei)雜交在(zai)遺傳育種方面的應用(yong)主要包括(kuo):
異(yi)源(yuan)染(ran)(ran)色質(zhi)及多種(zhong)染(ran)(ran)色體畸變檢測:通過遠緣雜交把有(you)用遺傳物(wu)質(zhi)基因(yin)的(de)異(yi)源(yuan)染(ran)(ran)色質(zhi)漸滲到(dao)植物(wu)中(zhong)。如帶(dai)有(you)幾種(zhong)抗病基因(yin)的(de)黑麥(mai)1R染(ran)(ran)色體已被整合(he)到(dao)許多高(gao)產的(de)小(xiao)麥(mai)品種(zhong)中(zhong)。原位雜交技術(shu)則是鑒定外源(yuan)染(ran)(ran)色體(質(zhi))的(de)有(you)效(xiao)手(shou)段(duan)。
基因組印記研究:基因組印記是指一個基因的兩條染色體上的DNA序列存在差異。通過植物原位雜交技術,可以檢測到基因組印記的存在和分布,從而幫助確定基因組的進化、遺傳和功能特征。
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