科銳諾生物(多圖)-植物組織RNA原位雜交技術服務

||| 產品編號：591629016 更新時間：2025-02-04

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分子病理學診斷主要應用于以下幾個方面：1、對于腫l瘤易感基因的檢測，對于腫l瘤高危人群的篩檢具有實用價值，如檢測GSTπ基因以判定個體暴露于致癌物是的致癌危險性。2、腫l瘤相關病毒的檢測，如采用原位雜交方法檢測標本中HPV、EBER等病毒。3、疑難腫l瘤的診斷和分類，尤其在鑒別診斷淋巴細胞增l生性疾病與淋巴細胞性腫l瘤上有著強大的特異性和可靠性。4、腫l瘤的個體化治l療，能夠根據腫l瘤發生l發展不同階段分子水平的特點，對腫l瘤的個體化和預見性治l療具有指導意義。5、腫l瘤的預后判斷，如采用熒光原位雜交技術（FISH）檢測HER-2基因在乳l腺l癌病例中的表達情況，配合術后治l療，指導臨床用藥選擇。

.雜交　（1）盛有2×SSC的塑料盤同，將干烤的濾膜飄浮在液面上，浸濕5分鐘。（2）將濾膜轉到200ml預洗液的玻璃皿中。濾膜何疊在一起，放于溶液中。用保鮮膜蓋住玻璃皿，放到位于培養箱內的旋轉平臺上。于50℃處理30分鐘。在這一步及以后的所有步驟中，應緩緩搖動濾膜，防止它們粘在一起。（3）用泡過預洗液的吸水棉紙輕輕地從膜表面拭去細菌碎片，以降低雜交背景而不影響陽性雜交信號的強度和清晰度。（4）將濾膜轉到盛有150ml預雜交液的玻璃中，在適宜溫度（即在水溶液中雜交時用68℃，而在50%甲酰胺中雜交時用42℃）下，預雜交1-2小時。（5）將32 P標記的雙鏈DNA探針于100℃加熱5分鐘，迅速置于冰浴中。單鏈探針不必變性。將探針加到雜交袋中雜交過夜。雜交期間，盛濾膜的容器應蓋嚴，植物組織RNA原位雜交技術服務，以防液體蒸發。

原位雜交（in situ hybridization）將(jiang)標記(ji)的(de)(de)核酸探針與(yu)細胞或(huo)組織中(zhong)的(de)(de)核酸進(jin)行雜交，稱為原位雜交，使用(yong)DNA或(huo)者RNA探針來(lai)檢(jian)測與(yu)其互補的(de)(de)另一條(tiao)鏈在細菌或(huo)其他真核細胞中(zhong)的(de)(de)位置。

原位雜交(jiao)技術的(de)(de)基本(ben)原理是利(li)用核(he)酸(suan)分(fen)子(zi)單鏈之間有(you)互補(bu)(bu)的(de)(de)堿基序(xu)列，將有(you)放1射(she)性或(huo)非放1射(she)性的(de)(de)外源核(he)酸(suan)(即探針)與組織、細胞(bao)(bao)或(huo)染色體(ti)上待測(ce)DNA或(huo)RNA互補(bu)(bu)配對，結(jie)合成專一(yi)的(de)(de)核(he)酸(suan)雜交(jiao)分(fen)子(zi)，經(jing)一(yi)定(ding)的(de)(de)檢測(ce)手(shou)段將待測(ce)核(he)酸(suan)在(zai)組織、細胞(bao)(bao)或(huo)染色體(ti)上的(de)(de)位置顯示出來。為顯示特(te)定(ding)的(de)(de)核(he)酸(suan)序(xu)列必須(xu)具備3個重要條件(jian)：組織、細胞(bao)(bao)或(huo)染色體(ti)的(de)(de)固定(ding)、具有(you)能與特(te)定(ding)片段互補(bu)(bu)的(de)(de)核(he)苷(gan)酸(suan)序(xu)列(即探針)、有(you)與探針結(jie)合的(de)(de)標記物

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