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先生: |
植(zhi)物(wu)染色(se)體原(yuan)位(wei)雜交(jiao)技術(shu)的應用非常(chang)廣泛。例如(ru),它可以用來研究(jiu)植(zhi)物(wu)基(ji)因(yin)組的結構和功(gong)能,包(bao)括(kuo)基(ji)因(yin)定位(wei)、染色(se)體重組、基(ji)因(yin)表達和基(ji)因(yin)組演(yan)化等方面。此外,該技術(shu)還可以用來檢(jian)測植(zhi)物(wu)中(zhong)的染色(se)體異常(chang),如(ru)染色(se)體缺失、重復和易位(wei)等。
植物(wu)染(ran)色(se)體原位(wei)雜(za)交技術的(de)優點在于它可(ke)(ke)以直接(jie)觀察到染(ran)色(se)體上的(de)目(mu)標DNA序列,而不需要進行PCR擴增或測序等操作。此外,該技術還可(ke)(ke)以同時檢(jian)測多(duo)個(ge)目(mu)標DNA序列,原位(wei)雜(za)交檢(jian)測,從而提高檢(jian)測效(xiao)率和準(zhun)確性。
原位雜交第二天
1.
1)將探(tan)針回收,放于(yu)-20C保(bao)存(通常(chang)探(tan)針可重復使用(yong)十次左(zuo)右)。
2)加入50%甲酰胺/2XSSCT溶液1毫升,染色體原位雜交,60℃,熒光原位雜交,放(fang)置30分鐘,重(zhong)復一(yi)次。
3)置換2XSSCT1ml,60℃,放置15分(fen)鐘。
4)置(zhi)換0.2XSSCT1ml,60℃,放置(zhi)30分鐘,重復一次。
2.
1)用MABT洗兩(liang)次,每(mei)次五分鐘,放(fang)在搖床輕輕搖動。
2)室溫下加1ml 1:2:7溶(rong)液,時間為一(yi)小時。
3)按1:3000的比例在1:2:7溶液中加(jia)入酶連,4C 冰箱過(guo)夜。
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武漢貝科新肽科技有限公司
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