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生物(wu)領域應用原位雜交技術(shu)的例子:
物(wu)(wu)(wu)種(zhong)(zhong)進(jin)(jin)化(hua)與(yu)系(xi)統(tong)發生(sheng)學(xue)研究:在物(wu)(wu)(wu)種(zhong)(zhong)進(jin)(jin)化(hua)與(yu)系(xi)統(tong)發生(sheng)學(xue)研究中,原位雜(za)交檢測,原位雜(za)交技術可(ke)以用(yong)于檢測物(wu)(wu)(wu)種(zhong)(zhong)之間的(de)親(qin)(qin)緣(yuan)關系(xi)和(he)進(jin)(jin)化(hua)歷程。例如,植物(wu)(wu)(wu)原位雜(za)交,可(ke)以比較不同物(wu)(wu)(wu)種(zhong)(zhong)之間特定基因序列(lie)的(de)差異,進(jin)(jin)而研究它們的(de)親(qin)(qin)緣(yuan)關系(xi)和(he)進(jin)(jin)化(hua)歷程。
原位雜交技術在基因表達和調控、細胞分化與發育、研究和物種進化與系統發生學等領域都有廣泛的應用價值,為深入探究生命現象、促進生物技術的發展提供了有力的技術支持。
生物(wu)領域應(ying)用原位雜(za)交技(ji)術(shu)的例(li)子:
基(ji)因(yin)表(biao)達和(he)調控研究(jiu):原(yuan)位(wei)雜(za)交技術可以用于研究(jiu)基(ji)因(yin)表(biao)達的調控機(ji)制。例如,可以標記特(te)定基(ji)因(yin)的探針,檢測(ce)該基(ji)因(yin)在不同環境、不同生長條(tiao)件下的表(biao)達情況,進而研究(jiu)其表(biao)達調控機(ji)制。
細(xi)胞(bao)分化(hua)與發(fa)育(yu)研(yan)究:在細(xi)胞(bao)分化(hua)與發(fa)育(yu)研(yan)究中,原位雜(za)交技術常被用于(yu)檢測和定位特定基因(yin)(yin)的(de)表達情(qing)況,進而了(le)解細(xi)胞(bao)分化(hua)的(de)過(guo)程和機制。例如,可(ke)以標記(ji)與細(xi)胞(bao)分化(hua)相(xiang)關(guan)的(de)基因(yin)(yin)探針,檢測該基因(yin)(yin)在不同(tong)組織(zhi)、不同(tong)發(fa)育(yu)階段的(de)表達情(qing)況。
組織原(yuan)位雜(za)交(jiao)(Tissue in situ hybridization),即(ji)原(yuan)位雜(za)交(jiao)組織化(hua)學技(ji)術和原(yuan)位雜(za)交(jiao)細胞化(hua)學技(ji)術
原位雜(za)交技(ji)術的基本原理
利(li)用核酸分子單(dan)鏈之間(jian)有互補的(de)堿(jian)基順(shun)序,通過(guo)堿(jian)基對之間(jian)非(fei)共價鍵的(de)形成,出現穩定的(de)雙(shuang)鏈區,形成雜交的(de)雙(shuang)鏈。
1.兩條核苷酸單鏈片段,在適宜的條件下,通(tong)過氫(qing)鍵結合,湖北原位(wei)雜交,形成DNA-DNA、DNA一(yi)RNA或(huo)RNA一(yi)RNA雙鍵分子
2.應用帶有標記的(有性同位(wei)素,如3H、35S、32P,染色體原位(wei)雜(za)交,熒(ying)光(guang)素、生物(wu)(wu)素、等非性物(wu)(wu)質(zhi))DNA或(huo)(huo)RNA片段作為核酸(suan)探針,與組(zu)織(zhi)切片或(huo)(huo)細胞內待(dai)測核酸(suan)(RNA或(huo)(huo)DNA)片段進行雜(za)交
3.用(yong)自顯影等(deng)方法予以(yi)顯示,在光鏡或電鏡下觀察目的mRNA或DNA的存在與定(ding)位
用原位(wei)(wei)雜交術,可在原位(wei)(wei)研究細胞合(he)成(cheng)某種(zhong)多肽或蛋白(bai)質的(de)基因表(biao)達(da)。
此方法有很高的敏感性和特異性,可進一步從分子水來探討細胞的功能表達及其調節機制。已成為當今細胞生物學、分子生物學研究的重要手段。
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