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染色體熒光原位雜交-武漢貝科新肽公司-原位雜交

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基因組原位雜交技術基因組原位雜交(Genome in situ hybridization,原位雜交,GISH)技術是20世紀80年代末發展起來的一種原位雜交技術。它主要是利用物種之間DNA同源性的差異,用另一物種的基因組DNA以適當的濃度作封阻,在靶染色體上進行原位雜交。GISH技術初應用于動物方面的研究(Pinkel et al.,1986),在植物上早應用于小麥和栽培種的鑒定(余舜武等 2001;王文奎等 2000)。

DNA 探針(zhen)為原位(wei)雜(za)(za)交提(ti)供較(jiao)高的(de)靈(ling)敏(min)度(du)。與RNA探針(zhen)相(xiang)比,DNA探針(zhen)與靶(ba)mRNA 分(fen)子的(de)雜(za)(za)交強度(du)較(jiao)弱,因此(ci)在雜(za)(za)交后的(de)洗滌(di)中不應使用(yong)甲醛。

探針特異性至關重要。如果已知細胞中mRNA或DNA的確切核苷酸序列,則可據此設計高度的互補探針。如果超過 5% 的堿基對不互補,染色體熒光原位雜交,那么探針只能與靶序列發生輕度雜交。這意味著,熒光原位雜交,探針更容易在洗滌和檢測步驟中被洗去,可能無法正確檢測。

原位雜交是一種強大的技術,它使研究人員能夠在細胞或組織中確定特定DNA或RNA序列的位置。這項技術在基礎研究和臨床應用中都有廣泛的應用。通過了解原位雜交的基本原理和實驗步驟,研究人員可以更好地理解其功能并應用于他們的研究中。

原(yuan)位雜(za)交技術的(de)(de)(de)(de)定義和基本原(yuan)理原(yuan)位雜(za)交技術是一種基于核(he)酸分子雜(za)交原(yuan)理,將標記的(de)(de)(de)(de)核(he)酸探(tan)針(zhen)與生物組(zu)織或(huo)細胞中的(de)(de)(de)(de)DNA或(huo)RNA進(jin)行(xing)特異性(xing)結合,從而在(zai)細胞水平上檢測目(mu)標核(he)酸序(xu)列(lie)分布的(de)(de)(de)(de)技術。原(yuan)位雜(za)交技術的(de)(de)(de)(de)基本原(yuan)理是利用DNA或(huo)RNA的(de)(de)(de)(de)互補(bu)性(xing),通過加熱或(huo)化(hua)學(xue)反應使(shi)探(tan)針(zhen)與組(zu)織或(huo)細胞中的(de)(de)(de)(de)目(mu)標核(he)酸序(xu)列(lie)形成雙(shuang)鏈復合物,進(jin)而實現目(mu)標核(he)酸序(xu)列(lie)的(de)(de)(de)(de)定位。

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