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原位雜交技術的原理是什(shen)么？有何用(yong)途
原位(wei)(wei)雜(za)交(jiao)(jiao)技術的(de)(de)(de)原理是利用核(he)酸(suan)(suan)分子(zi)單鏈之間有(you)互補的(de)(de)(de)堿基序列(lie)(lie)，將(jiang)有(you)性或非性的(de)(de)(de)外源(yuan)核(he)酸(suan)(suan)(即探針(zhen)(zhen))與組(zu)織、細胞或染(ran)色體(ti)(ti)(ti)上待(dai)測(ce)DNA或RNA互補配對，原位(wei)(wei)雜(za)交(jiao)(jiao)，結(jie)合(he)成專一(yi)的(de)(de)(de)核(he)酸(suan)(suan)雜(za)交(jiao)(jiao)分子(zi)，熒光原位(wei)(wei)雜(za)交(jiao)(jiao)，經(jing)一(yi)定(ding)(ding)(ding)的(de)(de)(de)檢測(ce)手段將(jiang)待(dai)測(ce)核(he)酸(suan)(suan)在組(zu)織、細胞或染(ran)色體(ti)(ti)(ti)上的(de)(de)(de)位(wei)(wei)置(zhi)顯示出來(lai)。為顯示特(te)定(ding)(ding)(ding)的(de)(de)(de)核(he)酸(suan)(suan)序列(lie)(lie)要(yao)具備3個重要(yao)條(tiao)件：組(zu)織、細胞或染(ran)色體(ti)(ti)(ti)的(de)(de)(de)固定(ding)(ding)(ding)、具有(you)能(neng)與特(te)定(ding)(ding)(ding)片段互補的(de)(de)(de)核(he)苷酸(suan)(suan)序列(lie)(lie)(即探針(zhen)(zhen))、有(you)與探針(zhen)(zhen)結(jie)合(he)的(de)(de)(de)標記物(曾呈奎等2000)。
原位雜(za)交(jiao)技(ji)(ji)術的(de)技(ji)(ji)術流(liu)程(cheng)
原位雜交技術的技術流程包括樣本處理、探針制備、雜交反應和信號檢測等步驟。樣本處理包括組織或細胞的固定、包埋、切片和脫氧核糖核酸酶消化等步驟，動物組織原位雜交，目的是保持組織或細胞的原始結構和核酸序列的完整性。探針制備包括標記探針、純化和變性等步驟，目的是提高探針的特異性和敏感性。雜交反應包括預雜交、雜交和洗脫等步驟，目的是使探針與目標核酸序列形成雙鏈復合物。信號檢測包括顯色反應、熒光染色和性同位素標記等步驟，目的是可視化目標核酸序列的分布。
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