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武漢貝科新肽科技有限公司
主營：原位(wei)雜交,亞細胞定位(wei),蛋白互作,啟動子篩選(xuan)
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將(jiang)(jiang)32 P標記的(de)雙(shuang)鏈(lian)DNA探(tan)針于100℃加熱(re)5分鐘，迅速置于冰浴中(zhong)。單鏈(lian)探(tan)針不(bu)必變性。將(jiang)(jiang)探(tan)針加到雜(za)交(jiao)袋(dai)中(zhong)雜(za)交(jiao)過(guo)夜。雜(za)交(jiao)期間，染色體原位雜(za)交(jiao)，盛濾(lv)膜的(de)容器應蓋嚴，以防液體蒸發。
雜(za)交結束(shu)后，去除雜(za)交液，立即(ji)于(yu)室溫把濾(lv)膜(mo)放(fang)入大體積（300-500ml）的(de)2×SSC和0.1% SDS溶(rong)液中，輕輕振搖5分鐘，并(bing)將濾(lv)膜(mo)至少翻(fan)轉一(yi)次。重復(fu)洗 一(yi)次，同(tong)時(shi)應避免(mian)膜(mo)干涸。
68℃用300-500ml 1×SSC和0.1% SDS溶液洗膜兩次，每次1-1.5小時。此時已可進行自顯影。如背景很高或實驗要求嚴格的洗膜條件，可用300-500ml 0.2×SSC和0.1% SDS的溶液于68℃將濾膜浸泡60分鐘。
植物組(zu)織原位雜(za)交的步驟包括以下(xia)幾個(ge)方面：
1. 制備組織樣品：從植物(wu)中取出需要研(yan)究(jiu)的組織樣品，湖北(bei)原位雜交，如根、莖、葉等。
2. 固定組織樣品(pin)：將(jiang)組織樣品(pin)固定在載(zai)玻片上，植物原位雜交(jiao)，通常使用或(huo)乙醇等化學物質進行固定。
3. 處理(li)組(zu)織樣品：對固定的組(zu)織樣品進行脫(tuo)水、透明化、脫(tuo)脂等處理(li)，以便于DNA探針的穿透和結合。
4. 制備DNA探針：根據(ju)需要研(yan)究的(de)基(ji)因(yin)序列，設計并合成DNA探針。DNA探針可以標記熒光染料(liao)或(huo)性同(tong)位(wei)素，以便于檢測。
5. 雜交(jiao)DNA探針：將DNA探針與(yu)組(zu)織樣品進行雜交(jiao)，通常需要在高(gao)溫(wen)下進行，以便(bian)于DNA探針與(yu)RNA或DNA結合(he)。
6. 檢測雜交信號：通過熒(ying)光顯微鏡(jing)或計數器等(deng)設備，檢測DNA探(tan)針與RNA或DNA的結合情況，確定目標基因的表(biao)達模式和(he)位置。
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