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意義
在研究DNA分子原理的基礎上發展起來的一種技術。其基本原理是兩條核苷酸單鏈片段,在適宜的條件下,能過氫鍵結合,形成DNA-DNA、DNA-RNA或 RNA-RNA 雙鍵分子的特點,應用帶有標記的(有性同位素,如3H、35S、32P、熒光素生物素、等非性物質)DNA或RNA片段作為核酸探針,與組織切片或細胞內待測核酸(RNA或DNA)片段進行雜交,然后可用自顯影等方法予以顯示,在光鏡或電鏡下觀察目的 mRNA或DNA 的存在并定位;用原位雜交技術,可在原位研究細胞合成某種多肽或蛋白質的基因表達。此方法有很高的敏感性和特異性,可進一步從分子水平來探討細胞的功能表達及其調節機制。已成為當今細胞生物學、分子生物學研究的重要手段。
適用場景
1、高靈敏度地檢(jian)測(ce)蛋(dan)白(bai)-蛋(dan)白(bai)的交互作用;
2、尋找在(zai)蛋白-蛋白交互作用(yong)中起關鍵作用(yong)的結構域或活性(xing)位點;
3、尋找與靶蛋(dan)(dan)白相互作(zuo)用的新蛋(dan)(dan)白;
4、尋找具(ju)有藥1物治1療(liao)作用的小分子多肽;
5、尋找調(diao)控(kong)蛋白(bai)質相(xiang)互作用的化合物(wu);
6、繪制蛋白質(zhi)相(xiang)互(hu)作(zuo)用圖譜。
酵母雙雜交技術的優(you)點
1、無需純化蛋白;
2、檢測在(zai)活1細胞(bao)內進行,可以在(zai)一(yi)定(ding)程度上代表體內的真(zhen)實(shi)情況;
3、檢測的(de)結(jie)果是基(ji)因(yin)(yin)表達產物(wu)的(de)積累效應(ying),植物(wu)原位(wei)雜交技術服務,因(yin)(yin)而可檢測存(cun)在于蛋(dan)白質之間的(de)微弱的(de)或暫時(shi)的(de)相(xiang)互作用;
4、酵母(mu)雙雜交系統可(ke)采用不同組(zu)織、器1官、細胞類(lei)型和分化時期材料構建cDNA文庫,并(bing)能分析細胞質(zhi)、細胞核等多種(zhong)亞細胞部位(wei)的蛋白(bai)。
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