鐵(tie)死亡(wang)主要(yao)有以(yi)下幾(ji)個(ge)特點：

① 鐵死亡(wang)，外(wai)泌體質譜檢測，細胞死亡(wang)過(guo)程中(zhong)伴隨著(zhu)大量的(de)鐵離子的(de)累積，同時還(huan)會(hui)出現(xian)脂質過(guo)氧(yang)化，ROS升高，也有一些調控鐵穩態和(he)脂質過(guo)氧(yang)化代謝等方面的(de)基因發(fa)生變化，

② 鐵死亡，在細胞的細微結構中，會出現比正常細胞小的線粒體，且線粒體膜皺縮，外泌體質譜服務，同時線粒體嵴減少或消失，外膜破碎，但細胞核中形態變化不明顯。

外(wai)泌體(ti)上的(de)TNF家(jia)(jia)族蛋(dan)白(bai)不能被膜(mo)型金屬蛋(dan)白(bai)酶切(qie)割，故較為(wei)穩定，同(tong)時(shi)借助膜(mo)形成三(san)聚體(ti)，具有很強的(de)誘導細(xi)胞凋亡的(de)活性。而且，人(ren)們(men)認為(wei)外(wai)泌體(ti)的(de)轉運TNF家(jia)(jia)族蛋(dan)白(bai)，與各種(zhong)炎1癥疾病(bing)(bing)和自身(shen)免1疫疾病(bing)(bing)的(de)產(chan)生相關。

例(li)如，從類風1濕關1節(jie)炎患(huan)者(zhe)的滑膜(mo)(mo)成纖維細胞(bao)中釋放(fang)出來的外泌體上，聚集高(gao)濃度(du)的膜(mo)(mo)結合型TNF-α，會加(jia)重(zhong)類風1濕關1節(jie)炎病情(qing)。

外泌體分離提(ti)取方案(an)。主要方案(an)包括(kuo)：

1、差速超(chao)1速離心法；

適用于細胞上清、灌洗液、尿液等大體積的樣(yang)品；

2、基于(yu)PEG沉淀原理的試劑盒法(fa)；

適用于血1清、腦脊液等(deng)小體積的樣品；

3、超濾提取法；

適用于(yu)細菌(jun)培養液或外泌體含量較(jiao)低的(de)樣品濃縮。亦可(ke)搭配(pei)超1速離(li)心(xin)法，做進(jin)一步的(de)提取。

外(wai)(wai)泌(mi)體(ti)(ti)是細胞外(wai)(wai)囊泡(pao)的(de)(de)(de)一(yi)(yi)種，其膜來源與(yu)粒(li)徑范圍與(yu)細胞外(wai)(wai)囊泡(pao)相(xiang)似，電(dian)鏡(jing)下(xia)，外(wai)(wai)泌(mi)體(ti)(ti)質譜，顯示出典(dian)(dian)型的(de)(de)(de)茶托狀超微結(jie)構。實際操(cao)作中，通過(guo)常規的(de)(de)(de)單一(yi)(yi)的(de)(de)(de)方(fang)法(fa)(fa)很難鑒(jian)(jian)(jian)定(ding)(ding)外(wai)(wai)泌(mi)體(ti)(ti)。鑒(jian)(jian)(jian)定(ding)(ding)外(wai)(wai)泌(mi)體(ti)(ti)需要包含形(xing)(xing)態(tai)、粒(li)徑、表面(mian)分子(zi)標記物等多方(fang)面(mian)的(de)(de)(de)鑒(jian)(jian)(jian)定(ding)(ding)。具體(ti)(ti)方(fang)法(fa)(fa)包括：透射電(dian)鏡(jing)（形(xing)(xing)態(tai)鑒(jian)(jian)(jian)定(ding)(ding)）、NTA檢(jian)(jian)(jian)測(ce)（粒(li)徑及(ji)濃(nong)(nong)度鑒(jian)(jian)(jian)定(ding)(ding)）、WB（分子(zi)標志物）。NTA檢(jian)(jian)(jian)測(ce)作為外(wai)(wai)泌(mi)體(ti)(ti)鑒(jian)(jian)(jian)定(ding)(ding)的(de)(de)(de)經典(dian)(dian)方(fang)法(fa)(fa)之一(yi)(yi)，可同時反映出檢(jian)(jian)(jian)測(ce)樣(yang)品(pin)的(de)(de)(de)濃(nong)(nong)度及(ji)粒(li)徑。質量(liang)較(jiao)好(hao)，純度較(jiao)高的(de)(de)(de)外(wai)(wai)泌(mi)體(ti)(ti)樣(yang)品(pin)，粒(li)徑分布在30-150nm，原(yuan)液濃(nong)(nong)度在10^9左(zuo)右(you)。為了保證檢(jian)(jian)(jian)測(ce)質量(liang)，外(wai)(wai)泌(mi)體(ti)(ti)質譜測(ce)試服務，對每一(yi)(yi)個樣(yang)品(pin)，都會進(jin)行3次技術重復。檢(jian)(jian)(jian)測(ce)周期(qi)為2-3個工(gong)作日，可當天到樣(yang)當天出結(jie)果。