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武漢貝科新肽科技有限公司
主營(ying)：原位雜交,亞細胞定位,蛋(dan)白互作(zuo),啟動子篩選
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您好，歡迎(ying)蒞(li)臨貝科(ke)新肽，歡迎(ying)咨詢...
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主要方法
免(mian)疫熒光技(ji)術(shu)：利用抗原與(yu)的(de)(de)(de)特異性結合(he)原理，將(jiang)熒光標記的(de)(de)(de)與(yu)細胞(bao)內的(de)(de)(de)目標蛋白結合(he)，湖(hu)北亞細胞(bao)定(ding)位，然后通過熒光顯微鏡觀(guan)察熒光信號的(de)(de)(de)位置(zhi)，從而(er)確定(ding)目標蛋白的(de)(de)(de)亞細胞(bao)定(ding)位。
綠(lv)色熒(ying)光蛋(dan)白(bai)(bai)(bai)（GFP）融合蛋(dan)白(bai)(bai)(bai)技術：將綠(lv)色熒(ying)光蛋(dan)白(bai)(bai)(bai)基(ji)因(yin)與目標蛋(dan)白(bai)(bai)(bai)基(ji)因(yin)融合，構建成融合蛋(dan)白(bai)(bai)(bai)表(biao)達載(zai)體。當該(gai)載(zai)體在(zai)細胞中(zhong)表(biao)達時(shi)，產生的(de)融合蛋(dan)白(bai)(bai)(bai)會帶有綠(lv)色熒(ying)光，洋蔥亞細胞定位，可直接通過熒(ying)光顯微鏡觀察其在(zai)細胞內的(de)分布，進而確定目標蛋(dan)白(bai)(bai)(bai)的(de)亞細胞定位。
基因(yin)法(fa)轉化洋蔥表皮細(xi)胞：
分別用70%乙醇和滅菌蒸餾水清洗金粉（直徑為1 μm），加入滅菌蒸餾水制成金粉懸浮液，取100 μL 放在含有1.0 cm2 洋蔥表皮的玻璃皿中，邊振蕩邊加入10 μL pCambia2301-GaMYB2-GFP質粒，逐步加入40 μL 0.1 mol·L-1 亞精胺和100 μL2.5 mol·L-1 CaCl2，振蕩混勻。基因GDS-80轟擊時氦氣罐的氣壓為1 300 psi，取10 μL DNA 包裹好的微粒懸浮液加到基因中央，進行轟擊，之后放置25℃避光過夜培養，使用ConfocalLaser激光共聚焦顯微鏡觀察。
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