原(yuan)位雜(za)(za)(za)交的(de)基本原(yuan)理是利(li)用標記的(de)核酸探針與(yu)細(xi)胞或(huo)組(zu)織中的(de)DNA或(huo)RNA進行(xing)雜(za)(za)(za)交，原(yuan)位雜(za)(za)(za)交檢(jian)測，然后通(tong)過(guo)檢(jian)測標記來識(shi)別探針的(de)位置。這使(shi)得研究人(ren)員能夠在(zai)細(xi)胞或(huo)組(zu)織中確定(ding)特定(ding)基因(yin)(yin)或(huo)基因(yin)(yin)組(zu)區(qu)域的(de)位置和表(biao)達水平。

原(yuan)位雜交可以(yi)(yi)(yi)用于多種類型(xing)的實驗。例如(ru)，它可以(yi)(yi)(yi)用來檢測(ce)(ce)特(te)定基因(yin)在發(fa)育過(guo)程中(zhong)的表達(da)模式，或者確(que)定特(te)定基因(yin)變異在細胞中(zhong)的分布。此(ci)外，原(yuan)位雜交還(huan)可以(yi)(yi)(yi)用于診斷疾(ji)病，例如(ru)某(mou)些(xie)類型(xing)的，以(yi)(yi)(yi)及監測(ce)(ce)效果。

雜交　（1） 盛有2×SSC的塑料盤同，將干烤的濾膜飄浮在液面上，浸濕5分鐘。（2） 將濾膜轉到200ml預洗液的玻璃皿中。濾膜何疊在一起，放于溶液中。用保鮮膜蓋住玻璃皿，放到位于培養箱內的旋轉平臺上。于50℃處理30分鐘。在這一步及以后的所有步驟中，應緩緩搖動濾膜，防止它們粘在一起。（3） 用泡過預洗液的吸水棉紙輕輕地從膜表面拭去細菌碎片，以降低雜交背景而不影響陽性雜交信號的強度和清晰度。（4） 將濾膜轉到盛有150ml預雜交液的玻璃中，在適宜溫度（即在水溶液中雜交時用68℃，而在50%甲酰胺中雜交時用42℃）下，預雜交1-2小時。

組(zu)織原位雜(za)交(jiao)(Tissue in situ hybridization），即原位雜(za)交(jiao)組(zu)織化(hua)學(xue)技術(shu)和原位雜(za)交(jiao)細胞化(hua)學(xue)技術(shu)

原(yuan)位雜交技術的基本原(yuan)理

利用(yong)核酸分(fen)子單鏈(lian)之間有互(hu)補的(de)(de)堿基(ji)順序，染(ran)色體原位雜(za)交，通過堿基(ji)對之間非共價鍵的(de)(de)形成，出現穩定的(de)(de)雙鏈(lian)區，植物原位雜(za)交，形成雜(za)交的(de)(de)雙鏈(lian)。

1.兩條核苷酸單鏈片(pian)段，在(zai)適宜的條件下，通(tong)過氫鍵(jian)結合，形成DNA-DNA、DNA一(yi)RNA或RNA一(yi)RNA雙鍵(jian)分子

2.應用帶有(you)標記的(de)（有(you)性同位素(su)，如3H、35S、32P，湖北原位雜(za)交(jiao)，熒光素(su)、生物(wu)素(su)、等(deng)非性物(wu)質)DNA或RNA片段(duan)作為核(he)酸探針，與組織切片或細胞內待測核(he)酸(RNA或DNA）片段(duan)進行雜(za)交(jiao)

3.用自(zi)顯影等方(fang)法予以顯示，在光鏡(jing)或電鏡(jing)下觀察目(mu)的(de)mRNA或DNA的(de)存在與定位

用原(yuan)位雜交術，可(ke)在(zai)原(yuan)位研究細胞(bao)合成某種多肽或蛋(dan)白質的基因表達(da)。

此方法有很高的敏感性和特異性，可進一步從分子水來探討細胞的功能表達及其調節機制。已成為當今細胞生物學、分子生物學研究的重要手段。

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