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將(jiang)少數菌(jun)落(luo)轉移到纖(xian)維(wei)素濾膜上
(1) 在(zai)含有選(xuan)擇性的瓊脂(zhi)平(ping)板(ban)上放(fang)一(yi)張纖維素濾膜。
(2) 用(yong)無菌(jun)(jun)牙簽將(jiang)各個(ge)菌(jun)(jun)落先轉移(yi)至濾膜上,再轉移(yi)至含有(you)選(xuan)擇性但未放濾膜的瓊(qiong)脂主平板(ban)上。應按一定的格子進行劃(hua)線(xian)接(jie)種(或打點)。每菌(jun)(jun)落應分(fen)別劃(hua)線(xian)于兩(liang)個(ge)平板(ban)的相同(tong)位(wei)置上。后,在濾膜和主平板(ban)上同(tong)時(shi)劃(hua)一個(ge)含有(you)非重組質粒的菌(jun)(jun)落。
(3) 倒置平板,于37℃培養至劃線(xian)的細菌菌落生長到0.5-1.0mm的寬(kuan)度。
(4) 用已裝防水黑色(se)繪(hui)圖墨水的(de)針(zhen)頭穿透濾膜直(zhi)至瓊脂,在3個(ge)以上(shang)(shang)的(de)不對稱位(wei)置作(zuo)標記。在主平板大致相同的(de)位(wei)置上(shang)(shang)也作(zuo)上(shang)(shang)標記。
(5) 用Parafilm膜封好主平板,倒置(zhi)貯放于4℃,直至獲得(de)雜交反應的結果。
(6) 裂解細菌,按本段下面所述方法,使釋放的DNA結合于纖維素濾膜。
通過分子檢測(ce)協助病(bing)理診斷
某些腫1瘤具有特定的分子病理學改變,對于病理常規染色難于診斷的這些腫1瘤,植物基因組原位雜交檢測技術服務,進行分子病理檢測可協助得出準確的病理診斷。例如淋巴1瘤的鑒別診斷往往依賴于形態和免1疫組化的綜合判斷,但有些時候,這些手段也不能滿足診斷的需要,這時我們通過IG或TCR基因重排檢測,可協助鑒別淋巴細胞的普通增殖和腫1瘤性增殖。
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