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在原(yuan)位雜(za)交(jiao)過程中,需要(yao)使用(yong)標(biao)記的(de)(de)核酸探針(zhen),通(tong)(tong)常是在性核素或(huo)非(fei)性物(wu)質中標(biao)記的(de)(de)。這些探針(zhen)可以通(tong)(tong)過不同(tong)的(de)(de)方(fang)式制(zhi)備,例如從已知序列的(de)(de)DNA或(huo)RNA制(zhi)備,或(huo)者通(tong)(tong)過使用(yong)生物(wu)信(xin)息(xi)學方(fang)法設計和合成新(xin)的(de)(de)探針(zhen)。
在(zai)進行原(yuan)位(wei)雜交時,細胞或組織需(xu)要固定在(zai)適當的(de)支持物(wu)上,例如載玻片(pian)。然后,探(tan)針與細胞或組織中的(de)DNA或RNA進行雜交,通常是在(zai)加熱條件下進行的(de)。接(jie)下來,通過洗滌和顯影步驟去除(chu)未結(jie)合的(de)探(tan)針和信號增強劑,后用(yong)顯微鏡(jing)觀察雜交信號的(de)位(wei)置(zhi)。
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