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植(zhi)物組織(zhi)原(yuan)(yuan)位(wei)雜交是一(yi)種(zhong)重要(yao)的(de)(de)分子生物學技術,它(ta)可以用(yong)來研究植(zhi)物基因的(de)(de)表達和(he)(he)(he)調控。該(gai)技術利用(yong)DNA探針與目(mu)標組織(zhi)中的(de)(de)RNA或DNA結合,從而(er)確定目(mu)標基因的(de)(de)表達模式和(he)(he)(he)位(wei)置。本文(wen)將介紹植(zhi)物組織(zhi)原(yuan)(yuan)位(wei)雜交的(de)(de)原(yuan)(yuan)理(li)、步驟(zou)和(he)(he)(he)應(ying)用(yong)。
原理
植物組織原位雜交的原理是利用DNA探針與目標組織中的RNA或DNA結合,熒光原位雜交,從而確定目標基因的表達模式和位置。DNA探針是一段已知序列的DNA分子,可以與目標RNA或DNA的互補序列結合。在組織原位雜交中,DNA探針通常標記有熒光染料或性同位素,以便于檢測。
原(yuan)位雜交(In situ hybridazation)
固定
收集斑(ban)馬魚的(de)胚胎,在(zai)(zai)Holfretor水中培(pei)養,到達所需(xu)(xu)要(yao)的(de)發育時期時,用(yong)(yong)(yong)蛋白(bai)酶去除卵膜,用(yong)(yong)(yong)4%多(duo)聚(ju)甲醛固定(ding),在(zai)(zai)4℃保(bao)存,二(er)十四(si)小(xiao)時后(hou)用(yong)(yong)(yong)50%2%多(duo)聚(ju)甲醛溶液洗,然(ran)后(hou)換(huan)成(cheng),在(zai)(zai)-20C 保(bao)存,待用(yong)(yong)(yong)(兩(liang)天和兩(liang)天以上的(de)胚胎需(xu)(xu)要(yao)用(yong)(yong)(yong)處理,去除色素。或(huo)者使用(yong)(yong)(yong)苯锍脲稀溶液培(pei)養,可(ke)阻斷色素的(de)形成(cheng))
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