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先生: |
同一樣本可以多次(ci)做原(yuan)位雜交(jiao)實(shi)驗嗎(ma)?
一般(ban)情況下,如果操作沒有得到理(li)想的(de)(de)結果,原位雜交檢測,是(shi)可以將探針(zhen)(zhen)洗(xi)滌然后進行(xing)再次的(de)(de)雜交的(de)(de)。如果使用(yong)的(de)(de)是(shi)直標型(xing)探針(zhen)(zhen),染色體(ti)原位雜交,還可以使用(yong)不同(tong)(tong)探針(zhen)(zhen)對同(tong)(tong)一樣本(ben)進行(xing)反復雜交。針(zhen)(zhen)對不同(tong)(tong)的(de)(de)樣本(ben),處理(li)方法略有不同(tong)(tong)。
原位(wei)雜交(jiao)實操中哪些因素比(bi)較(jiao)重(zhong)要?
重要的因素:溫度、光照、濕度和試劑的PH值。溫度和濕度直接影響著探針和目標DNA的雜交效率;光照影響著熒光染料的強度,所以探針要避光保存,其已經雜交的片子可用防熒光淬火劑封片且避光保存;各種試劑pH也要達到要求,這也直接關系到原位雜交的穩定性。
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