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染色體原位雜交檢測服務-武漢科銳諾生物(圖)

||| 產品編號:596004617                    更新時間:2025-04-20
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滴加封閉液(ye):37℃30分鐘。甩(shuai)去多余(yu)液(ye)體,不洗。

.滴加生物素(su)化鼠抗地1高辛:37℃ 60分(fen)鐘(zhong)或室溫120分(fen)鐘(zhong)。原(yuan)位(wei)雜交用PBS洗(xi)(xi)5分(fen)鐘(zhong)×4次。勿用其它緩沖液和蒸餾水洗(xi)(xi)滌。

滴加(jia)SABC:37℃20分(fen)(fen)鐘或室溫30分(fen)(fen)鐘。原(yuan)位雜交(jiao)用(yong)PBS洗(xi)5分(fen)(fen)鐘×3次。勿用(yong)其它緩沖液和蒸(zheng)餾水洗(xi)滌。

滴加生(sheng)物素化過(guo)氧化物酶:37℃20分(fen)(fen)鐘或室溫30分(fen)(fen)鐘。原(yuan)位雜交(jiao)用PBS洗(xi)5分(fen)(fen)鐘×4次。

DAB顯色(se):使用(yong)DAB顯色(se)試劑(ji)盒—1ml蒸餾水加顯色(se)劑(ji)A,B,C各一滴,混勻,加至(zhi)標本(ben)上。一般顯色(se)20-30分鐘(zhong)。若無背景出現則可繼續顯色(se)。也(ye)可自配(pei)DAB顯色(se)劑(ji)后顯色(se)。充分水洗。

.蘇(su)1木(mu)素復染,充分(fen)水洗。

酒精脫水,二甲1苯透明,封片。

原理

根據抗(kang)原(yuan)反(fan)(fan)應和(he)(he)化學(xue)(xue)顯(xian)(xian)色(se)原(yuan)理,染色(se)體原(yuan)位雜交檢測服務,組織(zhi)切(qie)片或細胞標本中(zhong)的(de)抗(kang)原(yuan)先和(he)(he)一抗(kang)結合,再利用(yong)一抗(kang)與標記(ji)生(sheng)物素(su)、熒(ying)光素(su)等(deng)的(de)二抗(kang)進行反(fan)(fan)應,前者再用(yong)標記(ji)辣根過氧化物酶(HRP)或堿性磷酸酶(AKP)等(deng)的(de)抗(kang)生(sheng)物素(su)(如鏈霉親和(he)(he)素(su)等(deng))結合,后(hou)通(tong)過呈色(se)反(fan)(fan)應或熒(ying)光來顯(xian)(xian)示細胞或組織(zhi)中(zhong)化學(xue)(xue)成分,在光學(xue)(xue)顯(xian)(xian)微(wei)鏡或熒(ying)光顯(xian)(xian)微(wei)鏡下可清晰(xi)看見細胞內(nei)發生(sheng)的(de)抗(kang)原(yuan)反(fan)(fan)應產物,從而能夠(gou)在細胞爬片或組織(zhi)切(qie)片上原(yuan)位確定某些化學(xue)(xue)成分的(de)分布和(he)(he)含量。

多彩色熒光原位雜交(multicolorfluorescenceinsituhybridization,mFISH)。它用幾種不同顏色的熒光素單獨或者混合標記的探針進行原位雜交,能同時檢測多個基因,擴大了FISH技術的臨床應用。FISH技術目前主要應用于染色體和DNA水平上的病理診斷檢測。染色體FISH主要檢測染色體易位、缺失、重復、變異等;DNAFISH主要是檢測基因突變、擴增、易位、缺失。與原位雜交技術相比,FISH更加安全、快速,特異性好、定位準確。

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