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原位雜交(jiao)(In situ hybridazation)
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收集斑馬魚的(de)胚胎,在Holfretor水中培養,到(dao)達所需要的(de)發育時期時,用(yong)蛋白(bai)酶(mei)去(qu)除(chu)卵膜,植物組織原(yuan)位雜(za)交,用(yong)4%多(duo)聚甲醛(quan)固定(ding),在4℃保存,二十(shi)四小(xiao)時后用(yong)50%2%多(duo)聚甲醛(quan)溶液洗,然后換成(cheng),在-20C 保存,待(dai)用(yong)(兩天和兩天以上的(de)胚胎需要用(yong)處理,去(qu)除(chu)色(se)素(su)。或者使(shi)用(yong)苯锍脲稀(xi)溶液培養,可阻斷色(se)素(su)的(de)形成(cheng))
生(sheng)物領域應(ying)用原位雜交技(ji)術(shu)的例子(zi):
基(ji)因表(biao)(biao)達和調控研(yan)究(jiu):原位雜交技術可以(yi)(yi)用于研(yan)究(jiu)基(ji)因表(biao)(biao)達的(de)調控機制。例如,可以(yi)(yi)標記(ji)特定基(ji)因的(de)探針,檢(jian)測(ce)該基(ji)因在(zai)不同環境、不同生長條(tiao)件下的(de)表(biao)(biao)達情況,進而研(yan)究(jiu)其表(biao)(biao)達調控機制。
細(xi)胞分(fen)(fen)化與發(fa)育(yu)研究(jiu):在細(xi)胞分(fen)(fen)化與發(fa)育(yu)研究(jiu)中,原(yuan)位(wei)雜(za)交技術(shu)常被用(yong)于(yu)檢測和(he)(he)定位(wei)特(te)定基(ji)(ji)因的(de)表達情況(kuang),進而了解(jie)細(xi)胞分(fen)(fen)化的(de)過程和(he)(he)機(ji)制(zhi)。例如,可以標記與細(xi)胞分(fen)(fen)化相關的(de)基(ji)(ji)因探(tan)針,檢測該基(ji)(ji)因在不(bu)同組織、不(bu)同發(fa)育(yu)階段的(de)表達情況(kuang)。
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