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武漢貝科新肽科技有限公司

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貝科新肽科技公司(圖)-熒光原位雜交-原位雜交

||| 產品編號:596418130                    更新時間:2025-04-28
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DNA 探(tan)針為原位雜(za)交(jiao)提供較(jiao)(jiao)高的靈敏度。與(yu)RNA探(tan)針相比,DNA探(tan)針與(yu)靶mRNA 分(fen)子的雜(za)交(jiao)強(qiang)度較(jiao)(jiao)弱,因此在雜(za)交(jiao)后(hou)的洗(xi)滌中不應使用甲(jia)醛。

探針特異性至關重要。如果已知細胞中mRNA或DNA的確切核苷酸序列,則可據此設計高度的互補探針。如果超過 5% 的堿基對不互補,那么探針只能與靶序列發生輕度雜交。這意味著,探針更容易在洗滌和檢測步驟中被洗去,可能無法正確檢測。

原位雜交第二天

1.

1)將探(tan)針回收,原位(wei)雜交檢測,放于-20C保存(通常探(tan)針可重(zhong)復使用十次左右)。

2)加(jia)入50%甲酰胺/2XSSCT溶液(ye)1毫升,60℃,植物原位雜交,放置(zhi)30分鐘,重復一次。

3)置換(huan)2XSSCT1ml,60℃,原位雜交,放(fang)置15分鐘。

4)置(zhi)換0.2XSSCT1ml,60℃,放(fang)置(zhi)30分鐘,重復一(yi)次。

2.

1)用MABT洗(xi)兩(liang)次(ci),每(mei)次(ci)五分鐘(zhong),放(fang)在搖床輕(qing)輕(qing)搖動。

2)室溫下(xia)加1ml 1:2:7溶液,時間為(wei)一小(xiao)時。

3)按1:3000的比例在1:2:7溶(rong)液(ye)中加(jia)入(ru)酶連,4C 冰箱過夜。

熒光原位雜交(FISH)技(ji)術(shu)具(ju)有以(yi)下優點:

可(ke)多重染色:利用(yong)不同(tong)的(de)熒光(guang)染料標記不同(tong)的(de)探針(zhen),可(ke)以實現多重熒光(guang)原(yuan)位(wei)雜(za)交,熒光(guang)原(yuan)位(wei)雜(za)交,從而同(tong)時檢測多個序列,提高實驗效(xiao)率了。

高度創新性和性:FISH技術不僅可以用于研究已知基因或序列的染色體定位,還可以用于未基因或遺傳標記及染色體畸變的研究,在基因定性、定量、整合、表達等方面的研究中頗具優勢。

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