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生物領域應用原位雜(za)交技術的例子(zi):
基因表(biao)達(da)和調控研(yan)究:原位雜交技術可以(yi)用于研(yan)究基因表(biao)達(da)的(de)調控機(ji)制(zhi)。例(li)如,可以(yi)標記特定基因的(de)探針,檢測該基因在(zai)不同(tong)環境、不同(tong)生長條件下(xia)的(de)表(biao)達(da)情(qing)況,進(jin)而研(yan)究其表(biao)達(da)調控機(ji)制(zhi)。
細胞(bao)分(fen)化(hua)與(yu)(yu)發(fa)(fa)育(yu)(yu)研究:在細胞(bao)分(fen)化(hua)與(yu)(yu)發(fa)(fa)育(yu)(yu)研究中,原(yuan)位雜交(jiao)技術常被用于檢(jian)測(ce)和(he)(he)定位特定基(ji)因(yin)的(de)表(biao)達(da)情況,染色體熒光原(yuan)位雜交(jiao),進而(er)了解細胞(bao)分(fen)化(hua)的(de)過(guo)程和(he)(he)機(ji)制。例如,可以(yi)標記(ji)與(yu)(yu)細胞(bao)分(fen)化(hua)相關的(de)基(ji)因(yin)探針(zhen),檢(jian)測(ce)該基(ji)因(yin)在不同組(zu)織、不同發(fa)(fa)育(yu)(yu)階段的(de)表(biao)達(da)情況。
原(yuan)位雜(za)交是一種(zhong)非常重要(yao)的(de)技(ji)術(shu)(shu),熒光原(yuan)位雜(za)交,因為它(ta)可以(yi)(yi)在細胞(bao)或(huo)組織(zhi)的(de)自(zi)然環境中研(yan)究基(ji)因表達和調控。它(ta)可以(yi)(yi)幫助(zhu)科學家們了解基(ji)因在特(te)定組織(zhi)或(huo)細胞(bao)類(lei)型(xing)中的(de)作用(yong)和功能(neng),植物(wu)原(yuan)位雜(za)交,以(yi)(yi)及在疾(ji)病(bing)發生和發展過程中的(de)變化。此外(wai),這(zhe)項技(ji)術(shu)(shu)還(huan)可以(yi)(yi)用(yong)于(yu)檢測基(ji)因變異和染(ran)色體(ti)異常,原(yuan)位雜(za)交,以(yi)(yi)及監測細胞(bao)生長和凋亡(wang)。
雖(sui)然原(yuan)位雜交是一項非常(chang)有用的(de)(de)(de)技術,但(dan)它也有一些(xie)限制。首先,探(tan)針的(de)(de)(de)特異(yi)性可(ke)能受到(dao)干擾,導致錯誤的(de)(de)(de)結(jie)果。其(qi)次,探(tan)針的(de)(de)(de)數量和(he)(he)位置(zhi)可(ke)能受到(dao)細胞或組織中其(qi)他成分的(de)(de)(de)影(ying)響。此外,這(zhe)項技術的(de)(de)(de)操作(zuo)比較繁瑣,需要專門(men)的(de)(de)(de)技術和(he)(he)設備,而且需要大量的(de)(de)(de)實驗(yan)和(he)(he)對照才能獲(huo)得可(ke)靠的(de)(de)(de)結(jie)果。
原位(wei)(wei)雜交技術(in situhybridization)是以標記(ji)(ji)的(de)核(he)酸(suan)(suan)分子為探針(zhen),在組織細(xi)(xi)胞(bao)原位(wei)(wei)檢測特異核(he)酸(suan)(suan)分子的(de)技術。使含有特異序列、經過標記(ji)(ji)的(de)核(he)酸(suan)(suan)單鏈即探針(zhen),在適(shi)宜條(tiao)件下與組織細(xi)(xi)胞(bao)中的(de)互補核(he)酸(suan)(suan)單鏈即靶核(he)酸(suan)(suan)發生雜交,再以自顯影或(huo)細(xi)(xi)胞(bao)化學方法對標記(ji)(ji)探針(zhen)進(jin)行探測,從而在細(xi)(xi)胞(bao)原位(wei)(wei)顯示特異的(de)DNA或(huo)RNA分子。
可以檢測cRNA、miRNA、LnRNA、DNA。可以各種種屬的標本,包括哺乳動物、爬行動物、菌、植物標本。也可以檢測組織芯片。
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