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湖北熒光原位雜交-武漢貝科新肽(圖)

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植(zhi)物染色(se)體(ti)原位(wei)(wei)雜交(jiao)技術(shu)的(de)應用(yong)非常(chang)廣泛(fan)。例如(ru),它可以用(yong)來研(yan)究(jiu)植(zhi)物基(ji)(ji)因組(zu)的(de)結構和(he)(he)(he)功能(neng),熒光原位(wei)(wei)雜交(jiao),包括基(ji)(ji)因定位(wei)(wei)、染色(se)體(ti)重組(zu)、基(ji)(ji)因表達和(he)(he)(he)基(ji)(ji)因組(zu)演化等方面。此外(wai),該技術(shu)還可以用(yong)來檢(jian)測植(zhi)物中的(de)染色(se)體(ti)異常(chang),如(ru)染色(se)體(ti)缺(que)失、重復和(he)(he)(he)易位(wei)(wei)等。

植(zhi)物染(ran)色(se)體(ti)原位雜交(jiao)技術(shu)的優點在于它可(ke)(ke)以直接(jie)觀察(cha)到染(ran)色(se)體(ti)上的目(mu)標DNA序(xu)列,而不需(xu)要進行PCR擴增或測序(xu)等(deng)操作。此外(wai),該技術(shu)還(huan)可(ke)(ke)以同時(shi)檢測多個目(mu)標DNA序(xu)列,從而提(ti)高檢測效率(lv)和準確性。

把濾(lv)膜(mo)放(fang)在(zai)(zai)紙巾上于室溫晾干后,把濾(lv)膜(mo)(編號面朝上)放(fang)在(zai)(zai)一張(zhang)保鮮膜(mo)上,并在(zai)(zai)保鮮膜(mo)上作幾個不對(dui)(dui)稱的標記(ji),以(yi)使(shi)濾(lv)膜(mo)與性(xing)自顯(xian)影片位置(zhi)對(dui)(dui)應。

用第二(er)張保鮮膜(mo)(mo)蓋住濾膜(mo)(mo)。加光片并加上(shang)增(zeng)感屏于(yu)-70℃曝光12-16小時。

底片顯影后,在底片上貼一張透明硬紙片。在紙上標記陽性雜交信號的位置,同時在不對稱分布點的位置上作出標記。可從底片上取下透明紙,通過對比紙上的點與瓊脂上的點來鑒定陽性菌落。

RNA原位核酸雜交又稱RNA原位雜交組織化學或RNA原位雜交。該技術是指運用cRNA或寡核苷酸等探針檢測細胞和組織內RNA表達的一種原位雜交技術。其基本原理是:在細胞或組織結構保持不變的條件下,用標記的已知的RNA核苷酸片段,按核酸雜交中堿基配對原則,與待測細胞或組織中相應的基因片段相結合(雜交),所形成的雜交體(Hybrids)經顯色反應后在光學顯微鏡或電子顯微鏡下觀察其細胞內相應的mRNA、rRNA和tRNA分子。RNA原位雜交技術經不斷改進,其應用的領域已遠超出DNA原位雜交技術。尤其在基因分析和診斷方面能作定性、定位和定量分析,已成為有效的分子病理學技術,同時在分析低豐度和罕見的mRNA表達方面已展示了分子生物學的一重要方向。

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