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植(zhi)物染色(se)體(ti)原位(wei)(wei)雜交(jiao)技術(shu)的(de)應用(yong)非常(chang)廣泛(fan)。例如(ru),它可以用(yong)來研(yan)究(jiu)植(zhi)物基(ji)(ji)因組(zu)的(de)結構和(he)(he)(he)功能(neng),熒光原位(wei)(wei)雜交(jiao),包括基(ji)(ji)因定位(wei)(wei)、染色(se)體(ti)重組(zu)、基(ji)(ji)因表達和(he)(he)(he)基(ji)(ji)因組(zu)演化等方面。此外(wai),該技術(shu)還可以用(yong)來檢(jian)測植(zhi)物中的(de)染色(se)體(ti)異常(chang),如(ru)染色(se)體(ti)缺(que)失、重復和(he)(he)(he)易位(wei)(wei)等。
植(zhi)物染(ran)色(se)體(ti)原位雜交(jiao)技術(shu)的優點在于它可(ke)(ke)以直接(jie)觀察(cha)到染(ran)色(se)體(ti)上的目(mu)標DNA序(xu)列,而不需(xu)要進行PCR擴增或測序(xu)等(deng)操作。此外(wai),該技術(shu)還(huan)可(ke)(ke)以同時(shi)檢測多個目(mu)標DNA序(xu)列,從而提(ti)高檢測效率(lv)和準確性。
把濾(lv)膜(mo)放(fang)在(zai)(zai)紙巾上于室溫晾干后,把濾(lv)膜(mo)(編號面朝上)放(fang)在(zai)(zai)一張(zhang)保鮮膜(mo)上,并在(zai)(zai)保鮮膜(mo)上作幾個不對(dui)(dui)稱的標記(ji),以(yi)使(shi)濾(lv)膜(mo)與性(xing)自顯(xian)影片位置(zhi)對(dui)(dui)應。
用第二(er)張保鮮膜(mo)(mo)蓋住濾膜(mo)(mo)。加光片并加上(shang)增(zeng)感屏于(yu)-70℃曝光12-16小時。
底片顯影后,在底片上貼一張透明硬紙片。在紙上標記陽性雜交信號的位置,同時在不對稱分布點的位置上作出標記。可從底片上取下透明紙,通過對比紙上的點與瓊脂上的點來鑒定陽性菌落。
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