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武漢貝科新肽科技有限公司

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貝科新肽科技公司-染色體原位雜交

||| 產品編號:597164314                    更新時間:2025-05-14
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原位雜交技術是在一定的溫度和離子濃度下,使具有特異序列的單鏈探針通過堿基互補規則與組織細胞內待測的核酸復性結合而使得組織細胞中的特異性核酸得到定位,并通過探針上所標記的檢測系統將其在核酸的原有位置上顯示出來。經特定標記的核苷酸鏈為探針,可與組織切片、細胞或染色體標本中的待檢DNA片段或mRNA進行雜交,染色體原位雜交,然后顯示標記物,從而分析待檢核酸的分布和含量。利用此項技術可研究各種基因在染色體上的定位,編碼某種蛋白質的mRNA在胞質中的表達。

原(yuan)位雜交(jiao)技(ji)術(shu)的實驗結果(guo)

原位雜交技術的實驗結果包括陽性信號和陰性信號的判斷標準。陽性信號是指探針與目標核酸序列特異性結合形成的雙鏈復合物,在顯色反應、熒光染色或性同位素標記下呈現出明顯的信號。陰性信號是指探針未與目標核酸序列結合,不呈現任何信號。實驗結果的分析需要結合探針的特異性和敏感性、組織或細胞的原始結構以及實驗條件等因素綜合進行。

DNA 探(tan)針為原位雜交(jiao)提供較高(gao)的(de)(de)靈敏度(du)。與RNA探(tan)針相比(bi),DNA探(tan)針與靶(ba)mRNA 分子(zi)的(de)(de)雜交(jiao)強度(du)較弱,因此在雜交(jiao)后(hou)的(de)(de)洗(xi)滌中(zhong)不應使用(yong)甲醛。

探針特異性至關重要。如果已知細胞中mRNA或DNA的確切核苷酸序列,則可據此設計高度的互補探針。如果超過 5% 的堿基對不互補,那么探針只能與靶序列發生輕度雜交。這意味著,探針更容易在洗滌和檢測步驟中被洗去,可能無法正確檢測。

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