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原(yuan)位雜交(jiao)技(ji)術(shu)的實驗結果(guo)
原位雜交技術的實驗結果包括陽性信號和陰性信號的判斷標準。陽性信號是指探針與目標核酸序列特異性結合形成的雙鏈復合物,在顯色反應、熒光染色或性同位素標記下呈現出明顯的信號。陰性信號是指探針未與目標核酸序列結合,不呈現任何信號。實驗結果的分析需要結合探針的特異性和敏感性、組織或細胞的原始結構以及實驗條件等因素綜合進行。
DNA 探(tan)針為原位雜交(jiao)提供較高(gao)的(de)(de)靈敏度(du)。與RNA探(tan)針相比(bi),DNA探(tan)針與靶(ba)mRNA 分子(zi)的(de)(de)雜交(jiao)強度(du)較弱,因此在雜交(jiao)后(hou)的(de)(de)洗(xi)滌中(zhong)不應使用(yong)甲醛。
探針特異性至關重要。如果已知細胞中mRNA或DNA的確切核苷酸序列,則可據此設計高度的互補探針。如果超過 5% 的堿基對不互補,那么探針只能與靶序列發生輕度雜交。這意味著,探針更容易在洗滌和檢測步驟中被洗去,可能無法正確檢測。
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