原位雜交第三天

1） ? ? ? ?用1ml含10％熱(re)滅清的MABT溶液(ye)置(zhi)換溶液(ye)，放置(zhi)搖床(chuang)上25分(fen)鐘，然后用1mlMABT置(zhi)換，25分(fen)鐘，再用1mlMABT溶液(ye)置(zhi)換，一(yi)小時以(yi)上，后用1mlMABT溶液(ye)置(zhi)換，熒光原位雜(za)交技術，25分(fen)鐘。

2） ? ? ? ?用1ml 1mM左旋米(mi)睉的(de)Staining buffer洗三次，每次放(fang)置五(wu)分鐘。

3）將胚胎轉入十六孔板(ban)中，吸去staining buffer，加(jia)(jia)上(shang)300ul BM Purple AP Substrate(底(di)物，用之前加(jia)(jia)5mM左旋(xuan)米唑)，十六孔板(ban)外面包上(shang)錫箔紙(zhi)以避光，避免搖動，室溫下顯色。

4）每隔一小時觀察胚胎是否開始顯色

5）將顯色完全(quan)的(de)胚胎(tai)中的(de)底物吸出，用PBST洗兩三次(ci)后(hou)加上4％多(duo)聚(ju)甲醛固(gu)定(ding)，拍照。

6）4C冰箱保存。

植(zhi)物(wu)染色體(ti)原位雜(za)交是一種重要的分子生物(wu)學技術，它可以用來研究(jiu)植(zhi)物(wu)基因組的結構和功能。該技術利用DNA探針與(yu)目標DNA序列的互(hu)補性結合，通過熒光或性標記來檢測目標DNA序列在染色體(ti)上的位置和數(shu)量(liang)。

植物染色體(ti)原(yuan)(yuan)位雜(za)(za)(za)交技術(shu)(shu)的(de)基本原(yuan)(yuan)理是將(jiang)DNA探(tan)針(zhen)標記(ji)上熒光或性同(tong)(tong)位素，原(yuan)(yuan)位雜(za)(za)(za)交檢測，然后將(jiang)其與目標DNA序列(lie)進行雜(za)(za)(za)交。在雜(za)(za)(za)交過程中，探(tan)針(zhen)與目標DNA序列(lie)互補結合，原(yuan)(yuan)位雜(za)(za)(za)交，形成穩定(ding)的(de)雙(shuang)鏈DNA分子。隨后，熒光原(yuan)(yuan)位雜(za)(za)(za)交，通(tong)過熒光或性同(tong)(tong)位素探(tan)測技術(shu)(shu)，可以檢測到目標DNA序列(lie)在染色體(ti)上的(de)位置(zhi)和數量。

原位雜交是一項非常重要的生物技術，可以用于研究基因表達和調控，檢測基因變異和染色體異常，監測細胞生長和凋亡，以及識別特定的細胞類型或組織。然而，它需要特殊的操作技術和設備，以及嚴格的對照實驗才能獲得可靠的結果。

原位雜交是一項(xiang)非常重要的(de)生物技術，可以用(yong)于研究(jiu)基因表達和調控，檢測(ce)基因變異和染(ran)色體異常，監測(ce)細胞生長和凋亡，以及識別特定的(de)細胞類型(xing)或組織(zhi)。然(ran)而，它需要特殊的(de)操作技術和設備，以及嚴格的(de)對照實驗(yan)才(cai)能獲得(de)可靠的(de)結果。

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