以菌(jun)(jun)(jun)落(luo)原位雜交為(wei)例(li)：對分散在若(ruo)干個瓊脂平(ping)(ping)板上的少數菌(jun)(jun)(jun)落(luo)（100-200）進行(xing)篩選時，可采用(yong)該方法。將這些菌(jun)(jun)(jun)落(luo)歸并到(dao)一個瓊脂主(zhu)(zhu)平(ping)(ping)板以及已置(zhi)于第二(er)個瓊脂平(ping)(ping)板表面的一張(zhang)纖維素濾膜上。經培養(yang)一段時間后，對菌(jun)(jun)(jun)落(luo)進行(xing)原位裂(lie)解。主(zhu)(zhu)平(ping)(ping)板應(ying)貯存(cun)于4℃直至得到(dao)篩選結果(guo)。

將少數菌(jun)落轉移(yi)到纖維素濾膜上

（1） 在含(han)有選擇性的瓊脂平板上放一張纖(xian)維(wei)素(su)濾膜。

（2） 用無菌牙(ya)簽將各(ge)個菌落(luo)先轉移至濾膜上，再轉移至含有(you)選擇性但未放濾膜的瓊脂主平(ping)板上。應按(an)一定的格子(zi)進行劃(hua)(hua)線接種（或(huo)打點）。每菌落(luo)應分別(bie)劃(hua)(hua)線于兩個平(ping)板的相同(tong)位置上。后，在濾膜和(he)主平(ping)板上同(tong)時劃(hua)(hua)一個含有(you)非重組質粒的菌落(luo)。

（3） 倒(dao)置平板，原(yuan)位雜交(jiao)檢測，于37℃培養至劃線的(de)細(xi)菌(jun)菌(jun)落(luo)生長到0.5-1.0mm的(de)寬(kuan)度。

（4） 用已裝防(fang)水黑(hei)色繪圖(tu)墨水的(de)針頭穿透(tou)濾膜直至瓊脂(zhi)，在(zai)3個(ge)以上(shang)(shang)的(de)不對(dui)稱位置(zhi)作(zuo)標記。在(zai)主平(ping)板大致相同(tong)的(de)位置(zhi)上(shang)(shang)也(ye)作(zuo)上(shang)(shang)標記。

（5） 用(yong)Parafilm膜封好主平板，倒置(zhi)貯放于4℃，直至獲得雜(za)交反(fan)應的(de)結(jie)果。

（6） 裂解細菌(jun)，按本段下面(mian)所(suo)述方(fang)法，使釋放(fang)的DNA結合于纖維(wei)素濾膜。

熒光原位雜交(Fluorescence in situ hybridization，染色體熒光原位雜交，FISH)技術是在已有的性原位雜交技術的基礎上發展起來的一種非性DNA分子原位雜交技術。它利用熒光標記的核酸片段為探針，與染色體上或DNA顯微切片上的特異fl-N：~行雜交，通過熒光檢測系統(熒光顯微鏡)檢測信號DNA序列在染色體或DNA顯微切片上的目的DNA序列，進而確定其雜交位點。FISH技術檢測時間短，湖北原位雜交，檢測靈敏度高，無污染，已廣泛應用于染色體的鑒定、基因定位和異常染色體檢測等領域。

原(yuan)位(wei)(wei)雜(za)交的(de)(de)基(ji)本原(yuan)理是利用標(biao)記的(de)(de)核酸探(tan)針與細胞或組(zu)織(zhi)中的(de)(de)DNA或RNA進行雜(za)交，熒光原(yuan)位(wei)(wei)雜(za)交，然(ran)后通過(guo)檢測標(biao)記來識別探(tan)針的(de)(de)位(wei)(wei)置。這使得研究人(ren)員能夠(gou)在(zai)細胞或組(zu)織(zhi)中確(que)定特定基(ji)因或基(ji)因組(zu)區域的(de)(de)位(wei)(wei)置和(he)表達水平。

原(yuan)位雜交可以(yi)(yi)用于多種類型(xing)的(de)實驗。例如(ru)，它(ta)可以(yi)(yi)用來檢(jian)測特定基因(yin)在(zai)發育過程中的(de)表(biao)達模(mo)式(shi)，或(huo)者確定特定基因(yin)變異在(zai)細胞中的(de)分布。此外，原(yuan)位雜交還可以(yi)(yi)用于診(zhen)斷疾(ji)病，例如(ru)某些類型(xing)的(de)，以(yi)(yi)及監測效果。

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