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原位雜交
實驗原理
原(yuan)位(wei)雜交技(ji)術(in situhybridization)是以標記(ji)的核酸分子為探針,在組織細(xi)胞(bao)原(yuan)位(wei)檢測特異(yi)核酸分子的技(ji)術。
使含有特異序列、經過標記的核酸單鏈即探針,在適宜條件下與組織細胞中的互補核酸單鏈即靶核酸發生雜交,再以自顯影或細胞化學方法對標記探針進行探測,從而在細胞原位顯示特異的DNA或RNA分子。
原(yuan)位末端(duan)凋亡檢測(Tunel)
實驗原理: TUNEL技術可對(dui)組織(zhi)或(huo)細(xi)胞(bao)中凋(diao)(diao)(diao)亡小體或(huo)單(dan)個凋(diao)(diao)(diao)亡細(xi)胞(bao)進行(xing)染(ran)色(se),能準確反映細(xi)胞(bao)凋(diao)(diao)(diao)亡典型的(de)(de)生物(wu)化(hua)學和形態(tai)特(te)征。凋(diao)(diao)(diao)亡細(xi)胞(bao)內(nei)內(nei)源性核(he)(he)酸(suan)內(nei)切(qie)酶被(bei)而(er)將(jiang)(jiang)自身染(ran)色(se)體DNA切(qie)斷成缺口或(huo)3-OH末端(duan)(duan)片段這(zhe)一特(te)點,利用脫(tuo)氧核(he)(he)苷酸(suan)末端(duan)(duan)轉(zhuan)移(yi)酶將(jiang)(jiang)標有標記物(wu)(如,生物(wu)素或(huo)熒(ying)光(guang)素)的(de)(de)脫(tuo)氧核(he)(he)苷酸(suan)轉(zhuan)移(yi)到3-OH末端(duan)(duan),再(zai)用組化(hua)法或(huo)熒(ying)光(guang)檢測凋(diao)(diao)(diao)亡細(xi)胞(bao)。
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