HE染(ran)色(se)(se)流(liu)程(cheng)是(shi)什么(me)，很(hen)多人都不知道，今(jin)天跟著小編(bian)一(yi)起來學(xue)習(xi)一(yi)下(xia)，切片的(de)(de)好壞直接影響(xiang)疾病診斷的(de)(de)及時與準確(que)性。因此一(yi)張高質(zhi)量的(de)(de)HE染(ran)色(se)(se)切片，是(shi)實驗室必須掌(zhang)握的(de)(de)技(ji)術之一(yi)。HE染(ran)色(se)(se)目(mu)前在(zai)國(guo)內國(guo)外病理診斷上(shang)被

廣泛采用，常規的(de)(de)染色方法。下(xia)面(mian)一起(qi)來看HE染色的(de)(de)基本順(shun)序。一般(ban)切片(pian)的(de)(de)片(pian)子(zi)應(ying)在60-70度左(zuo)右的(de)(de)烤箱(xiang)中烘烤30分鐘(zhong)以才可以進行染色。總的(de)(de)來說(shuo)是一個時(shi)間(jian)較(jiao)長(chang)的(de)(de)過(guo)程(cheng)。

1.樣品制備

對于貼壁生(sheng)長細(xi)胞，胰酶消(xiao)化，調整細(xi)胞濃度約1×105/ml，滴加于蓋玻片(pian)上(置于6孔板中)，培養(yang)相應(ying)時間(jian)后，取出細(xi)胞爬片(pian)，用PBS 洗滌3次。2.樣品固(gu)(gu)定 ?95%乙(yi)醇固(gu)(gu)定20min，PBS洗滌2次，每次1min。3.染核 ?蘇mu

素染(ran)液染(ran)色2-3min，自來(lai)水洗滌。4.分色 ?鏡下觀(guan)察，若細胞核(he)染(ran)色過(guo)深，用(yong)1%鹽酸酒精溶液分色數秒，自來(lai)水洗滌。 ?5.染(ran)胞質(zhi) ?浸入(ru)伊紅染(ran)液染(ran)色1min，自來(lai)水洗滌。6.封片(pian) ?吹干或自然晾gan細胞爬片(pian)后，中性樹膠封片(pian)。

以(yi)上六點就是HE染色的基本步驟，大家可以(yi)參考一下哦

切片機通常由控制系統、機械系統、驅動系統、刀架、刀片、罩殼等組成。病理切片制作時將部分有病變的組織或臟器經過各種化學品（脫水、透明）和埋藏法的處理，使之固定硬化（包埋），在切片機上切成薄片，粘附在玻片上，染以各種顏色（染色），供在顯微鏡下檢查，以觀察病理變化，作出病理診斷。

病理切片的制作步驟注意事項：

一、負(fu)責組織處理(li)的技術員從醫(yi)生(sheng)手(shou)中收(shou)標本(ben)時(shi)，必(bi)須(xu)清點查對，無誤后(hou)簽收(shou)。

二、組織(zhi)脫水、包埋、切片、染色、封片等，植(zhi)物石蠟切片三(san)維重構技術服務，均應(ying)按照技術規范進(jin)行，對(dui)每道工序(xu)，都必須查對(dui)組織(zhi)數量，檢查是否遺漏、丟失(shi)。

常見的(de)(de)(de)(de)生(sheng)(sheng)物(wu)切(qie)(qie)(qie)片(pian)，厚(hou)(hou)度一(yi)般在幾微(wei)(wei)米的(de)(de)(de)(de)程度，這(zhe)種厚(hou)(hou)度制作(zuo)(zuo)起來(lai)比較簡單，除了(le)可(ke)以使用自動化(hua)的(de)(de)(de)(de)設備來(lai)切(qie)(qie)(qie)片(pian)之(zhi)(zhi)外，手(shou)動操(cao)作(zuo)(zuo)也(ye)能切(qie)(qie)(qie)到(dao)(dao)這(zhe)種厚(hou)(hou)度，而(er)(er)且(qie)完(wan)夠滿足光學顯微(wei)(wei)鏡(jing)下觀察的(de)(de)(de)(de)標準。不過在前沿的(de)(de)(de)(de)科(ke)研(yan)領域里(li)，需(xu)要(yao)(yao)(yao)觀察更(geng)(geng)細(xi)微(wei)(wei)的(de)(de)(de)(de)細(xi)胞(bao)(bao)結(jie)構，甚至需(xu)要(yao)(yao)(yao)從(cong)分子(zi)的(de)(de)(de)(de)層面來(lai)進行(xing)研(yan)究(jiu)，這(zhe)時候就(jiu)需(xu)要(yao)(yao)(yao)用到(dao)(dao)電子(zi)顯微(wei)(wei)鏡(jing)。然(ran)而(er)(er)電子(zi)顯微(wei)(wei)鏡(jing)也(ye)需(xu)要(yao)(yao)(yao)更(geng)(geng)薄的(de)(de)(de)(de)樣品(pin)，切(qie)(qie)(qie)片(pian)至少要(yao)(yao)(yao)達到(dao)(dao)0.1微(wei)(wei)米的(de)(de)(de)(de)厚(hou)(hou)度，而(er)(er)這(zhe)種切(qie)(qie)(qie)片(pian)也(ye)就(jiu)被稱為是超薄切(qie)(qie)(qie)片(pian)，在很多實(shi)驗研(yan)究(jiu)里(li)需(xu)要(yao)(yao)(yao)厚(hou)(hou)度達到(dao)(dao)50納米，顯然(ran)手(shou)I操(cao)作(zuo)(zuo)是無法達到(dao)(dao)這(zhe)種厚(hou)(hou)度的(de)(de)(de)(de)。那么在實(shi)驗環(huan)境下是怎樣做成這(zhe)種超薄生(sheng)(sheng)物(wu)切(qie)(qie)(qie)片(pian)的(de)(de)(de)(de)呢?首先是需(xu)要(yao)(yao)(yao)進行(xing)更(geng)(geng)好的(de)(de)(de)(de)固定(ding)，因為在如此薄的(de)(de)(de)(de)尺度之(zhi)(zhi)下，不但基本的(de)(de)(de)(de)細(xi)胞(bao)(bao)結(jie)構都(dou)已經被完(wan)全(quan)破壞(huai)，而(er)(er)且(qie)其中的(de)(de)(de)(de)細(xi)胞(bao)(bao)器也(ye)都(dou)被切(qie)(qie)(qie)開(kai)，里(li)面的(de)(de)(de)(de)生(sheng)(sheng)物(wu)酶會釋(shi)放出來(lai)，并且(qie)在很短(duan)的(de)(de)(de)(de)時間內使細(xi)胞(bao)(bao)結(jie)構遭(zao)到(dao)(dao)破壞(huai)。所(suo)以就(jiu)需(xu)要(yao)(yao)(yao)在取得樣品(pin)之(zhi)(zhi)后盡快(kuai)進行(xing)固定(ding)，要(yao)(yao)(yao)求(qiu)在一(yi)-分鐘之(zhi)(zhi) 內完(wan)成這(zhe)項(xiang)操(cao)作(zuo)(zuo)，然(ran)后再(zai)使用對(dui)應的(de)(de)(de)(de)材料來(lai)做透明化(hua)以及包(bao)埋，接下來(lai)還(huan)需(xu)要(yao)(yao)(yao)配合的(de)(de)(de)(de)切(qie)(qie)(qie)片(pian)機(ji)來(lai)完(wan)成切(qie)(qie)(qie)片(pian)的(de)(de)(de)(de)過程，從(cong)而(er)(er)達到(dao)(dao)理想的(de)(de)(de)(de)厚(hou)(hou)度。

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